奧曲肽（Octreotide）酶聯(lián)免疫分析ELISA試劑盒僅供研究使用

1 使用目的
本試劑盒用于飼料、魚、蝦和肉類組織（如雞、牛肉和豬肉），雞蛋、蜂蜜、牛奶、血清和尿樣中奧曲肽（Octreotide）殘留的定量檢測。
2 實驗原理：
本試劑盒采用競爭ELISA方法，在微孔板包被有奧曲肽（Octreotide）偶聯(lián)抗原，加入奧曲肽（Octreotide）標(biāo)準(zhǔn)品或樣品，游離奧曲肽（Octreotide）與微孔條上預(yù)包被的奧曲肽（Octreotide）偶聯(lián)抗原互相競爭抗奧曲肽（Octreotide）抗體酶標(biāo)記物，用TMB底物顯色，加入終止液后顏色由藍色變?yōu)辄S色，用酶標(biāo)儀在450nm波長下進行檢測，吸光值與樣品中奧曲肽（Octreotide）含量成反比，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中奧曲肽（Octreotide）的含量。
3 試劑盒組成 ：
3.1 預(yù)包被的奧曲肽（Octreotide）偶聯(lián)抗原的可拆酶標(biāo)板：1塊（12孔×8條）。
3.2奧曲肽（Octreotide）標(biāo)準(zhǔn)品：6瓶（1ml/瓶），含量分別是：0ug/ml, 4 ug/ml,12 ug/ml,36 ug/ml,108 ug/ml,324 ug/ml
3.3抗奧曲肽（Octreotide）抗體酶結(jié)合物：1瓶（6ml）。
3.4顯色液A：1瓶（6ml）。
3.5顯色液B：1瓶（6ml）。
3.6終止液：1瓶（6ml），2M硫酸。
3.7*：1瓶（10×, 6ml），用于樣品稀釋用。
3.8濃縮洗滌液：1瓶（20×，20ml），用于洗板。
3.9說明書一份。
4 需要而未提供的材料
4.1 設(shè)備
4.1.1波長450nm酶標(biāo)儀。
4.1.2粉碎機。
4.1.3量筒。
4.1.4振蕩器。
4.1.5漏斗。
4.1.6Whatman 或相當(dāng)?shù)臑V紙。
4.1.7微量移液器。
4.2 試劑
4.2.1去離子水或蒸餾水。
4.2.2 甲醇。
5 貯存
5.1 試劑盒貯存于2~8℃，切勿冷凍
5.2 未用完的微孔板應(yīng)該密封干燥保存
6 注意事項
6.1 使用試劑盒前請仔細閱讀說明書。
6.2 不要使用過期試劑盒。
6.3 試劑盒使用前，將試劑恢復(fù)至室溫（25±2℃），建議至少回溫2小時。
6.4 標(biāo)準(zhǔn)品中含有奧曲肽（Octreotide），使用時應(yīng)特別注意，操作時應(yīng)帶手套。
6.5 終止液中含有硫酸，使用時防止灼傷皮膚及腐蝕衣物。
6.6 不同標(biāo)準(zhǔn)品、樣品所用吸頭不能混用，否則會影響試驗結(jié)果。
6.7 不同批號試劑盒中的試劑不得混用；不同標(biāo)準(zhǔn)品、樣品所用吸頭不得混用，否則會影響實驗結(jié)果。
6.8 稀釋樣本時必須用本試劑盒中的*，否則會影響實驗結(jié)果
6.9 混合試劑時應(yīng)避免起泡。
7 工作液準(zhǔn)備
7.1奧曲肽（Octreotide）標(biāo)準(zhǔn)品溶液：0ug/ml, 4 ug/ml,12 ug/ml,36 ug/ml,108 ug/ml,324 ug/ml
7.2 濃縮洗滌液：用蒸餾水按1:20（1+19）稀釋備用
7.3 *：備用
7.3 顯色劑：已備用，避免光線直照
7.4 反應(yīng)終止液：已備用
8 樣品處理程序（樣品在提取過程中，要嚴格按說明書操作，提取過程中應(yīng)準(zhǔn)確稀釋，否則會出現(xiàn)結(jié)果不準(zhǔn)確，樣品應(yīng)當(dāng)保存在陰涼避光之處及冷藏保存）
8.1取10g粉碎的樣品，加 20ml 70%甲醇溶液
8.2強力振蕩3分鐘
8.3用Whatman 濾紙過濾
8.4取100µl處理后的樣品，加入400µl*
8.5取50μl稀釋液進行分析（稀釋倍數(shù)10）
動物組織前處理
8.6準(zhǔn)確稱取1±0.05 g勻漿后的組織樣品到50 ml的聚苯乙烯離心管中；加入3ml乙腈--丙酮提取溶液，2000rpm劇烈震蕩20s后4000r/min以上離心5min
8.7取上清液0.8ml在50℃氮氣流下吹干
8.8加入2mL1×樣品稀釋液Ⅰ, 750rpm渦旋20s
8.9取100ml用于分析
飼料前處理方法
8.10準(zhǔn)確稱取1±0.05 g粉碎飼料樣品到50 ml的聚苯乙烯離心管中；加入4ml乙腈，1ml丙酮，2000rpm劇烈震蕩20s后4000r/min以上離心3min
8.11取上清液0.7ml在50℃氮氣流下吹干
8.12加入1mL1×樣品稀釋液Ⅰ,渦旋20s，取出100ml加到900ml 1×樣品稀釋液Ⅰ，混勻后取100?l用于分析
牛奶前處理方法
8.13取1 ml牛奶樣品到2 ml離心管中；用 1×樣品稀釋液Ⅱ稀釋30倍，混勻后取100?l用于分析
奶粉前處理方法
8.14準(zhǔn)確稱取0.3g奶粉樣品到7 ml的聚苯乙烯離心管中；加入2ml 1×樣品稀釋液Ⅲ，2 ml正己烷，震蕩混勻
8.154000r/min以上離心5min，去除有機層和中間層，取下層溶液100ml到300ml 1×樣品稀釋液Ⅲ
8.16混勻后取100ml用于分析