操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)。
中文名稱:冰凍動(dòng)植物組織RNA穩(wěn)定-過(guò)渡溶液
英文名稱:ICE Tissue Stabilizer
產(chǎn)品規(guī)格:100ml
發(fā)貨周期:1~3天
產(chǎn)品貨號(hào):BJ-F0163302
生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)中,常常需要從液體樣品(如血漿,培養(yǎng)基)中純化病毒,但由于病毒顆粒十分細(xì)小,傳統(tǒng)的分離方法是使用長(zhǎng)時(shí)間超速離心才能將其從液體樣品中分離出來(lái),此操作非常繁瑣,并且病毒在此過(guò)程中容易變性。為了克服傳統(tǒng)方法的缺點(diǎn),本公司開(kāi)發(fā)了本產(chǎn)品。
產(chǎn)品介紹:
本品是一種新型的冰凍組織過(guò)渡溶液,可以幫助解凍冰凍組織,同時(shí)保護(hù)RNA完整性,從而可以使冰凍組織轉(zhuǎn)變到普通的勻漿方法易于處理的狀態(tài),以提取高質(zhì)量的RNA。處理后的冰凍組織不需要在勻漿前將其碾磨成粉,甚至在勻漿前可以進(jìn)一步對(duì)組織進(jìn)行切割。加入RNAKeeper-ICE溶液后,組織從堅(jiān)硬的冰凍狀態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)槿彳洜顟B(tài),此時(shí)該溶液滲入組織,使RNA酶失活。用本品溶液處理后,組織可以在室溫下操作而不用擔(dān)心RNA會(huì)發(fā)生降解。而且,樣品能被安全的稱重,進(jìn)一步切割,或者進(jìn)行多種實(shí)驗(yàn)而不影響RNA的質(zhì)量。處理后的組織樣品可以直接加入到裂解溶液中破碎,也可以置于-20℃長(zhǎng)期保存。 本產(chǎn)品適用于動(dòng)物組織以及培養(yǎng)細(xì)胞、白細(xì)胞。經(jīng)測(cè)試,可用于肝、腎、脾、肺、心、胸腺、胰等組織的保存。 本產(chǎn)品與基于異硫氰酸胍的RNA提取試劑如Total RNA Extraction Reagent, Trizol,或基于離心柱的RNA提取試劑盒兼容。 應(yīng)用實(shí)例 1. 將本品在-70℃或-80℃預(yù)冷。 2. 樣品保存: A.動(dòng)物組織:按100 mg組織比不小于1 ml 本品的比例,將冰凍組織浸沒(méi)于預(yù)冷的本品中。注意:組織塊的厚度應(yīng)不過(guò)0.5 cm,否則會(huì)影響本品的滲透效率,導(dǎo)致RNA穩(wěn)定效果變差。 B.培養(yǎng)細(xì)胞、白細(xì)胞:收集細(xì)胞,用PBS清洗后加入至少10倍體積本品,蓋緊管蓋,上下顛倒數(shù)次。此時(shí)沉淀是否被*懸浮對(duì)實(shí)驗(yàn)無(wú)影響。 3. 將浸沒(méi)于本品的組織轉(zhuǎn)移至-20℃存放。至少16小時(shí)后,組織即可勻漿進(jìn)入后續(xù)提取過(guò)程;若不立即勻漿,組織可繼續(xù)在-20℃穩(wěn)定存放6個(gè)月。這個(gè)過(guò)程中,組織可從溶液中取出,在室溫進(jìn)行切割、稱重等操作(注意在室溫暴露的時(shí)間不要過(guò)30分鐘)后繼續(xù)浸沒(méi)在本品中保存。 4. RNA提?。簩⒔M織取出,用鑷子輕輕擠掉多余的本品溶液,置于裂解液中,立刻勻漿。如果是細(xì)胞樣品,10000g,4℃離心1分鐘,棄上清,加入裂解液。 |
使用方法:本產(chǎn)品僅用于科研
注意:標(biāo)本采集人員需按有關(guān)規(guī)定做好個(gè)人防護(hù)。咽、鼻拭子最好在發(fā)病的3天采集。
在安全柜內(nèi)將本產(chǎn)品分裝到自備的、螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的5mL旋蓋塑料管里(一級(jí)容器)。
鼻拭子的采集:將棉簽輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處,停留片刻后緩慢轉(zhuǎn)動(dòng)退出。以同一拭子拭兩側(cè)鼻孔。將棉簽浸入上步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中,棄去拭子尾部,擰緊螺旋蓋。
咽拭子的采集:用棉簽擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁,將棉簽浸入第一步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中,棄去拭子尾部,擰緊螺旋蓋。
直接在一級(jí)容器上用油性記號(hào)筆寫(xiě)明樣本的種類、采樣時(shí)間、編號(hào)、患者姓名。
將密閉后的標(biāo)本放入大小適合的塑料袋內(nèi)密封;每袋裝一份標(biāo)本。同時(shí)也將標(biāo)本有關(guān)信息填在標(biāo)本送檢表上,連同一級(jí)容器封于塑料袋內(nèi)。
將裝標(biāo)本的密封袋放入自備的帶螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的塑料容器(二級(jí)容器)內(nèi),擰緊蓋,在容器上標(biāo)明有關(guān)信息。同一患者2份以上的密封標(biāo)本,可以放在同一個(gè)二級(jí)容器內(nèi)。二級(jí)容器要承受不少于95 KPa的壓力,內(nèi)襯具吸水和緩沖能力的物質(zhì)。所有容器必須印有生物危險(xiǎn)標(biāo)注。
將二級(jí)容器擺放在專用運(yùn)輸箱內(nèi)(或疫苗運(yùn)輸箱),放入冰排,然后以柔軟物質(zhì)填充,并密封,由專人(2人)運(yùn)送,不得郵寄,最好使用專車。
采集的標(biāo)本若不能在24小時(shí)內(nèi)送達(dá),則應(yīng)盡快在-70℃以下保存。無(wú)-70℃條件的,需在4℃冰箱短時(shí)間暫存,并盡快聯(lián)系遞送標(biāo)本。流感病毒在-20℃~-40℃時(shí)不穩(wěn)定,故長(zhǎng)期保存最好在-70℃溫度以下進(jìn)行。
組織SPHK激酶總活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)
細(xì)胞SPHK1激酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒(510)
組織SPHK1激酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒(510)
細(xì)胞SPHK2激酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒(510)
組織SPHK2激酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒(510)
人P27蛋白elisa 人P27蛋白試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 人P27蛋白試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人P27蛋白試劑盒、人P27蛋白elisa 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 Schleicheol 1 256445-66-6 中文名: 分子式:C30H52O2 度:% 關(guān)鍵詞: 抗癌; 久樹(shù); 豆甾烷; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)
人H-rasELISAKit 3-(5-(2-Aminopropyl)-7-cyanoindolin-1-yl)propyl benzoate (2R,3R)-2,3-dihydroxysuccinate 中文名: 分子式:C26H31N3O8
人HA絲酸肽酶1(HA1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 Human HA1 (HA Serine Peptidase 1) ELISA Kit 3,4-Dihydro-3,4-dihydroxynaphthalen-1(2H)-one 中文名: 分子式:C10H10O3
人Dickkopf1elisa 人Dickkopf 1試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 人Dickkopf 1試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人Dickkopf 1試劑盒、人Dickkopf 1 elisa 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 Testosterone benzoate 2088-71-3 中文名:17-安息香酸雄烯醇酮 分子式:C26H32O3 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
人chemerinelisa 人chemerin試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 人chemerin試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人chemerin試劑盒、人chemerin elisa 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 Triethyl 77-93-0 中文名:檸檬酸三乙酯 分子式:C12H20O7 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)
冰凍動(dòng)植物組織RNA穩(wěn)定-過(guò)渡溶液唑啉,唑啉菌素 Cefazolin 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR PlaVitaminD2,VD2elisa植物D2(VD2)elisa規(guī)格:96T/48T
唑啉 Cefazolin 質(zhì)量規(guī)格:>99%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶5(MMP-5)ELISA 試劑盒
文多靈 Vindoline 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Rat soluble iercellular adhesion molecule 1 (sICAM-1) ELISA Kit 大鼠可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)elisa
Theophylline 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Humancomplemeconolprotein,CCPELISAKit 人補(bǔ)體調(diào)節(jié)蛋白(CCP)elisa 96T/48T 進(jìn)口分裝
苯甲酰新烏頭原堿 Benzoylmesaconine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Humanai-Histoneaibody,AHAelisa人抗組蛋白抗體(AHA)elisa規(guī)格:96T/48T
葫蘆巴堿 Trigonelline 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 植物0脂酶D1(PhospholipaseD1)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒20
琥珀酸;丁二酸 Succinic acid 質(zhì)量規(guī)格:AR,>99% HumanVascuoarendothelialcellgrowthfactorreceptor2,VEGFR-2/Flk-1ELISAKit人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體3(VEGFR-3/Flt-4)elisa規(guī)格:96T/48T
琥珀酸;丁二酸 Succinic acid 質(zhì)量規(guī)格:>99%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶4(MMP-4)elisa ,英文名: MMP-4 ELISA Kit
α-乳香酸 alpha-Boswellic acid 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠分泌型球蛋白A(sIgA)ELISA檢測(cè)試劑盒RatsecretoryimmunoglobulinA,sIgAELISAKit 96T/48T
野馬追內(nèi)酯A Eupalinolide A 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 人腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)試劑盒 Human iFABP ELISA Kit
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。