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魚elisa試劑盒原理

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更新時(shí)間:2022-06-23 13:29:11瀏覽次數(shù):788次

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魚elisa試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中待測物質(zhì)水平。用純化的待測物質(zhì)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入待測物質(zhì),再與HRP標(biāo)記 的待測物質(zhì)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。

魚elisa試劑盒可用于測定血清、血漿及相關(guān)液體樣本中待測物質(zhì)的含量。

實(shí)驗(yàn)原理:

魚elisa試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中待測物質(zhì)水平。用純化的待測物質(zhì)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入待測物質(zhì),再與HRP標(biāo)記 的待測物質(zhì)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終 的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測物質(zhì)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD 值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測物質(zhì)濃度。


 

魚elisa試劑盒的免疫測定:

免疫測定是一種很敏感的測定方法,抗原抗體反應(yīng)后直接測定形成的沉淀或濁度,敏感度可達(dá)5~10μg/ml,但在檢驗(yàn)中,某些待測物在標(biāo)本中的含量遠(yuǎn)低于這一水平,因此要尋找增加敏感度的方法。標(biāo)記的免疫測定是將檢測試劑中的抗原或抗體用可微量測定的物質(zhì)加以標(biāo)記,通過測定標(biāo)記物來提高敏感度。在放射免疫測定和酶免疫測定中,標(biāo)記物分別為放射性核素和酶,zui后用測定放射性和酶活力來計(jì)算待檢物的量,敏感度可比直接測定沉淀物提高數(shù)百至數(shù)千倍。在標(biāo)記免疫測定中,一般加入過量的標(biāo)記試劑以保證與待測物*反應(yīng)。以標(biāo)記抗體(Ab※)檢測抗原(Ag)為例,反應(yīng)式如下:Ag+Ab※→AgAb※+Ab※。

魚elisa試劑盒的敏感性:

在測定血清中某一物質(zhì)的含量時(shí),化學(xué)比色法的敏感度為mg/ml水平,酶反應(yīng)測定法的敏感度約為5~10μg/ml,免疫測定中凝膠擴(kuò)散法和濁度法的敏感度與酶反應(yīng)法相仿。標(biāo)記的免疫測定的敏感度可提高數(shù)千倍,達(dá)ng/ml水平。例如,用放射免疫測定法或酶免疫測定法測定HBsAg,其敏感度可達(dá)0.1ng/ml。

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