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公司是*的ATCC細胞供應商，提供人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細胞；NK-92MI [NK92MI]
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細胞名稱  人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細胞；NK-92MI [NK92MI]  
形態(tài)特性   淋巴母細胞  
生長特性  懸浮生長  
特征特性   NK-92是從一位患有急進性非霍奇金淋巴瘤的50歲白人男性外周血單核細胞衍生來的一株白細胞介素-2依賴型NK細胞株。 NK-92MI是轉染得到的源自NK-92的IL-2非依賴的NK細胞株。 親本細胞通過微粒體基因轉化法用逆轉錄病毒MFG-hIL-2載體攜帶的人IL-2 cDNA進行轉化。 可能由于載體整合到基因組DNA中，轉化是穩(wěn)定的。 這株細胞對很多惡性細胞有細胞毒性；鉻釋放試驗顯示它能殺死K562和Daudi細胞。 NK-92細胞有以下特征： CD2, CD7, CD11a, CD28, CD45,   
培養(yǎng)條件   α－MEM：Alpha Minimum Essential Medium (with Nucleosides)  馬血清， 12.5%；優(yōu)質胎牛血清，12.5%  
傳代方法   1:2。3天內可長滿。  
傳代情況  PN5  
凍存條件   *培養(yǎng)基+8%DMSO  
支原體檢測  陰性　  
STR    
同工酶    
染色體    
人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細胞；NK-92MI [NK92MI]
使用權限  A類培養(yǎng)需要滿足以下條件
1、無菌、無毒的環(huán)境：首先應保證被培養(yǎng)的細胞處于無菌、無毒的環(huán)境，即對培養(yǎng)液和所有的培養(yǎng)用具進行無菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素以防培養(yǎng)過程中的污染。

2、營養(yǎng)物質：細胞體外培養(yǎng)所需營養(yǎng)物質與體內基本相同，需要有葡萄糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等。通常還需加入血清、血漿等一些天然成分。

3、溫度和pH：細胞體外培養(yǎng)的適宜溫度一般與動物的體溫相近。多數(shù)細胞生存的適宜pH為7.2～7.4。

4、氣體環(huán)境：培養(yǎng)所需氣體主要有O2和CO2，O2是細胞代謝所必需的，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。進行細胞培養(yǎng)時，通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶，將其置于含95%空氣加5% CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
5）規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝  
細胞接受后的處理：  
1）收到細胞后，請檢查是否漏液，如果漏液，請拍照片發(fā)給我們。  
2）請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài)，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。  
3）棄去T25瓶中的培養(yǎng)基，添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。  
4）如果細胞長滿（90%以上）請及時進行細胞傳代，傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。  
5）接到細胞次日，請檢查細胞是否污染，若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染，請及時與我們取得。  
細胞用途：僅供科研使用。  
小鼠腎足細胞  
小鼠膀胱癌細胞  
細胞特性  
1）來源：小鼠膀胱癌  
2）形態(tài)：上皮細胞樣  
3）含量：>1x106 個/mL  
4）污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性  
5）規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝  
運輸和保存：使用含有優(yōu)質胎牛血清的2ml凍存管發(fā)送存活細胞。收到細胞后，可在1000RPM，常溫條件下，離心5min后，于潔凈操作臺棄去上清，加入使用的培養(yǎng)基后轉移至10cm培養(yǎng)皿或者T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，傳代達到細胞生長狀態(tài)良好時，再進行凍存。具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。  
細胞用途：僅供科研使用。  
小鼠卵巢上皮癌細胞  
細胞特性  
1） 來源：小鼠卵巢癌組織  
2） 形態(tài)：上皮細胞樣，貼壁生長  
3） 含量：>1x106 個/mL  
4） 污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性  
5） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝  
細胞接受后的處理：  
1） 收到細胞后，請檢查是否漏液，如果漏液，請拍照片發(fā)給我們。  
2） 請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài)，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。  
3） 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基，添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。  
4） 如果細胞長滿（90%以上）請及時進行細胞傳代，傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。  
5） 接到細胞次日，請檢查細胞是否污染，若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染，請及時與我們取得。  
細胞用途：僅供科研使用。  
小鼠間質細胞  
細胞介紹  
TM3細胞在LH作用下cAMP產量升高，但對促卵泡激素沒有響應。對LH的響應持續(xù)時間與血清批次有關。在LH存在下，細胞可以代謝。  
細胞特性  
1）來源：小鼠，間質  
2）形態(tài)：上皮細胞樣，貼壁生長  
3）含量：>1x106 個/mL  
4）污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性  
5）規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝  
細胞接受后的處理：  
1）收到細胞后，請檢查是否漏液，如果漏液，請拍照片發(fā)給我們。  
2）請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài)，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。  
3）棄去T25瓶中的培養(yǎng)基，添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。  
4）如果細胞長滿（90%以上）請及時進行細胞傳代，傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。  
5）接到細胞次日，請檢查細胞是否污染，若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染，請及時與我們取得。