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公司是*的ATCC細胞供應(yīng)商，提供人肺成纖維細胞；HFL1的報價，咨詢，稱技術(shù)服務(wù)，咨詢選購。
細胞名稱  人肺成纖維細胞；HFL1  
形態(tài)特性   成纖維細胞樣  
生長特性  貼壁生長  
特征特性      
培養(yǎng)條件   F12K  優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%  
傳代方法   消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。  
傳代情況  P(10+5)  
凍存條件   *培養(yǎng)基+8%DMSO  
支原體檢測  陰性　  
STR    
同工酶    
染色體    
使用權(quán)限  A類培養(yǎng)需要滿足以下條件
1、無菌、無毒的環(huán)境：首先應(yīng)保證被培養(yǎng)的細胞處于無菌、無毒的環(huán)境，即對培養(yǎng)液和所有的培養(yǎng)用具進行無菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素以防培養(yǎng)過程中的污染。

2、營養(yǎng)物質(zhì)：細胞體外培養(yǎng)所需營養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同，需要有葡萄糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等。通常還需加入血清、血漿等一些天然成分。

3、溫度和pH：細胞體外培養(yǎng)的適宜溫度一般與動物的體溫相近。多數(shù)細胞生存的適宜pH為7.2～7.4。

4、氣體環(huán)境：培養(yǎng)所需氣體主要有O2和CO2，O2是細胞代謝所必需的，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。進行細胞培養(yǎng)時，通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶，將其置于含95%空氣加5% CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
1）收到細胞后，請檢查是否漏液，如果漏液，請拍照片發(fā)給我們。  
2）請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài)，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。  
3）棄去T25瓶中的培養(yǎng)基，添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。  
4）如果細胞長滿（90%以上）請及時進行細胞傳代，傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。  
5）接到細胞次日，請檢查細胞是否污染，若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染，請及時與我們?nèi)〉谩?nbsp; 
細胞用途：僅供科研使用。  
大鼠胰腺外分泌細胞  
細胞介紹  
在腎上腺皮質(zhì)激素刺激下可誘導(dǎo)出外分泌活性，并伴有廣泛的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)重構(gòu)。  
細胞特性  
來源：胰腺外分泌細胞腫瘤  
形態(tài)：上皮細胞樣  
含量：>1x106 個/mL  
污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性  
規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝  
運輸和保存：使用含有優(yōu)質(zhì)胎牛血清的2ml凍存管發(fā)送存活細胞。收到細胞后，可在1000RPM，常溫條件下，離心5min后，于潔凈操作臺棄去上清，加入使用的培養(yǎng)基后轉(zhuǎn)移至10cm培養(yǎng)皿或者T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，傳代達到細胞生長狀態(tài)良好時，再進行凍存  
大鼠嗜堿性白血病細胞  
細胞介紹  
RBL-2H3是1978年國立牙科研究所的免疫學實驗室從Wistar大鼠保持腫瘤狀態(tài)的嗜堿性細胞中分離和克隆出來的嗜堿性白血病細胞株。這些細胞具有高親和力的IgE受體。通過集聚這些受體或與鈣離子載體協(xié)同作用可以激活它們分泌組胺及其他遞質(zhì)。這株細胞廣泛地用于研究肥大細胞FcERI和分泌的生化途徑。RBL-2H3細胞是研究FcERI結(jié)構(gòu)的模型。它們廣泛地用于研究細胞分泌的不同方面，包括細胞內(nèi)鈣濃度改變、磷酸脂酶激活、蛋白激酶和小G蛋白的作用。雖然幾乎所有批號的FBS都支持細胞的生長，但在某些批號中FcERI集聚后脫?；酶?。另一株大鼠嗜堿性細胞株(RBL，ATCC CRL-1378)不會脫?；?。  
細胞特性  
1）來源：大鼠外周血  
2）形態(tài)：成纖維細胞  
3）含量：>1x106 個/mL  
4）污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性  
5）規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝  
運輸和保存：使用含有優(yōu)質(zhì)胎牛血清的2ml凍存管發(fā)送存活細胞。收到細胞后，可在1000RPM，常溫條件下，離心5min后，于潔凈操作臺棄去上清，加入使用的培養(yǎng)基后轉(zhuǎn)移至10cm培養(yǎng)皿或者T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，傳代達到細胞生長狀態(tài)良好時，再進行凍存。  
大鼠腦I型星形膠質(zhì)細胞  
大鼠腦間質(zhì)細胞  
大鼠腦膠質(zhì)瘤細胞  
細胞介紹  
膠質(zhì)細胞株C6是由Benda等用N-nitrosomethylurea誘導(dǎo)的大鼠膠質(zhì)瘤克隆，并經(jīng)過一系列的體外培養(yǎng)和動物傳代交替后建成的。當細胞從低密度生長到滿瓶時，S-100產(chǎn)量增加10倍。  
細胞特性  
來源：大鼠，膠質(zhì)瘤  
形態(tài)：成纖維細胞，貼壁生長  
含量：>1x106 個/mL  
污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性  
規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝  
運輸和保存：使用T25瓶充液發(fā)送活細胞。收到細胞后，請先在顯微鏡下檢查細胞生長狀態(tài)，并將T25瓶置于培養(yǎng)箱約6h或過夜后，再次檢查細胞狀態(tài)。若狀態(tài)良好，可按照以下細胞培養(yǎng)步驟進行細胞后續(xù)處理操作。若發(fā)現(xiàn)可疑污染物，請及時與我們?nèi)〉谩?nbsp; 
細胞用途：僅供科研使用。  
大鼠腦星形膠質(zhì)細胞  
細胞特性  
1）來源：腦  
2）含量：>1x106 個/mL  
3）污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性  
4）規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝  
運輸和保存：可選擇干冰運輸及發(fā)送復(fù)蘇存活細胞方式：（1）干冰運輸，收到后立即轉(zhuǎn)入液氮凍存或直接復(fù)蘇；（2）存活細胞，收到后應(yīng)繼續(xù)生長，傳代達到細胞生長狀態(tài)良好時，再進行凍存。  
大鼠垂體瘤細胞  
細胞介紹  
GH3細胞系是由Tashjian AH等在1965年7月從一只7月齡的雌性Wistar-Furth大鼠的垂體腫瘤中分離建立的。GH3細胞系不是直接來源于GH1細胞系的克隆，而是從原代培養(yǎng)的GH1細胞在大鼠身上傳代兩次形成的腫瘤中建立的。上皮樣的GH3細胞比GH1分泌更高水平的生長激素，也可產(chǎn)生催乳素。對調(diào)控GH3細胞分泌蛋白類激素的研究表明，可以刺激生長激素的分泌、抑制催乳素的產(chǎn)生。  
細胞特性  
1） 來源：大鼠，垂體瘤  
2） 形態(tài)：上皮細胞樣，疏松貼壁，有漂浮的細胞簇  
3） 含量：>1x106 個/mL