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上海莼試生物技術(shù)有限公司

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人胚肺成纖維細(xì)胞;Walvax-2
人胚肺成纖維細(xì)胞;Walvax-2
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更新時(shí)間:2017-06-06 10:12:08瀏覽次數(shù):312

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【簡單介紹】
人胚肺成纖維細(xì)胞;Walvax-2收到細(xì)胞時(shí),若干冰已經(jīng)*融化,請(qǐng)立即將細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng);若尚留有干冰,請(qǐng)立即將細(xì)胞放入液氮中保存待用,請(qǐng)按條件貯存細(xì)胞,切不可將細(xì)胞置于高溫環(huán)境。

公司是*的ATCC細(xì)胞供應(yīng)商,提供人胚肺成纖維細(xì)胞;Walvax-2的報(bào)價(jià),咨詢,稱技術(shù)服務(wù),咨詢選購。
細(xì)胞名稱  人胚肺成纖維細(xì)胞;Walvax-2  
形態(tài)特性   成纖維細(xì)胞樣  
生長特性  貼壁生長  
特征特性   該細(xì)胞屬保藏,其特征特性尚未公開。   
培養(yǎng)條件   MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS  
傳代方法   1:3傳代,3-4天傳1次  
傳代情況  C5  
凍存條件   基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS   
支原體檢測(cè)  陰性   
STR    
同工酶    
染色體    
使用權(quán)限  未定培養(yǎng)需要滿足以下條件
1、無菌、無毒的環(huán)境:首先應(yīng)保證被培養(yǎng)的細(xì)胞處于無菌、無毒的環(huán)境,即對(duì)培養(yǎng)液和所有的培養(yǎng)用具進(jìn)行無菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素以防培養(yǎng)過程中的污染。

2、營養(yǎng)物質(zhì):細(xì)胞體外培養(yǎng)所需營養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同,需要有葡萄糖、氨基酸、促生長因子、無機(jī)鹽、微量元素等。通常還需加入血清、血漿等一些天然成分。

3、溫度和pH:細(xì)胞體外培養(yǎng)的適宜溫度一般與動(dòng)物的體溫相近。多數(shù)細(xì)胞生存的適宜pH為7.2~7.4。

4、氣體環(huán)境:培養(yǎng)所需氣體主要有O2和CO2,O2是細(xì)胞代謝所必需的,CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶,將其置于含95%空氣加5% CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,待細(xì)胞長至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍(lán)。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。

機(jī)理以及發(fā)展新的治療方法。  
細(xì)胞特性  
1)組織來源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常腹腔主動(dòng)脈組織。  
2)細(xì)胞鑒定:血小板-內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子(PECAM-1/CD31)或血管假性血友病子(WF)免疫熒光染色為陽性。  
3)鑒定細(xì)胞純度高于90%。  
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。  
5)細(xì)胞生長方式:鋪路石狀細(xì)胞,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。  
腹腔主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞  
細(xì)胞詳述  
腹腔主動(dòng)脈是人體的大動(dòng)脈,直接延續(xù)于發(fā)自左心室的主動(dòng)脈,胸腔主動(dòng)脈,沿脊柱左側(cè)下行,主要負(fù)責(zé)腹腔臟器和腹壁的血液供應(yīng)。動(dòng)脈疾病發(fā)生的一個(gè)主要素是由于血管平滑肌細(xì)胞轉(zhuǎn)變成為了具有繁殖能力的表型。近期的研究表明平滑肌細(xì)胞能表達(dá)鈣離子通道,ICAM-1和CAM-1。其中ICAM-1和CAM-1的表達(dá)可能是造成血管壁炎癥反應(yīng),并進(jìn)一步造成血管疾病的原 。此,對(duì)動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞的體外培養(yǎng)和研究可用來發(fā)現(xiàn)和確定新的血管疾病的靶向治療方法。  
細(xì)胞特性  
1)組織來源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常腹腔主動(dòng)脈組織。  
2)細(xì)胞鑒定:平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)免疫熒光染色為陽性。  
3)鑒定細(xì)胞純度高于90%。  
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。  
5)細(xì)胞生長方式:長梭形細(xì)胞,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。  
腹腔主動(dòng)脈外膜成纖維細(xì)胞  
細(xì)胞詳述  
腹腔主動(dòng)脈是人體的大動(dòng)脈,直接延續(xù)于發(fā)自左心室的主動(dòng)脈,胸腔主動(dòng)脈,沿脊柱左側(cè)下行,主要負(fù)責(zé)腹腔臟器和腹壁的血液供應(yīng)。主動(dòng)脈是由內(nèi)膜、中層彈力層和外膜構(gòu)成,三層緊密貼合在一起。其中,外膜是專門的支持組織,外膜成纖維是外膜的主要成分,在血管炎癥反應(yīng)、血管重塑等方面發(fā)揮重要作用。  
細(xì)胞特性  
1)組織來源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常主動(dòng)脈組織。  
2)細(xì)胞鑒定:波形蛋白(imentin)免疫熒光染色為陽性。  
3)鑒定細(xì)胞純度高于90%。  
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。  
5)細(xì)胞生長方式:長梭形細(xì)胞,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。  
股動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞  
細(xì)胞詳述  
股動(dòng)脈是下肢動(dòng)脈的主干,由髂外動(dòng)脈延續(xù)而來。在腹股溝韌帶中點(diǎn)的深面入股三角。在股三角內(nèi),股動(dòng)脈先位于股靜脈的外側(cè),逐漸從外側(cè)跨到股靜脈的前方,下行入收肌管,再穿收肌腱裂孔至腘窩,易名腘動(dòng)脈。股動(dòng)脈在腹股溝中點(diǎn)處位置表淺,可摸到搏動(dòng),是臨床上急救壓迫止血和進(jìn)行穿刺的部位。股動(dòng)脈動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞組成了動(dòng)脈內(nèi)壁,并持續(xù)受到血流剪切應(yīng)力的影響。內(nèi)皮細(xì)胞在切應(yīng)力的作用下,分泌不同的內(nèi)皮子并進(jìn)而影響血管收縮和生長。主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞也調(diào)節(jié)細(xì)胞黏附分子的表達(dá)來控制和精確調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)和組織纖維化。體外培養(yǎng)的原代股動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞可有效地幫助研究者研究內(nèi)皮功能失調(diào)的機(jī)理,動(dòng)脈粥樣化等疾病的發(fā)病機(jī)理以及發(fā)展新的治療方法。  
細(xì)胞特性  
1)組織來源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常股動(dòng)脈組織。  
2)細(xì)胞鑒定:血管假性血友病子(WF)免疫熒光染色為陽性。  
3)鑒定細(xì)胞純度高于90%。  
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。  
5)細(xì)胞生長方式:鋪路石狀細(xì)胞,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。  
股動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞  
細(xì)胞詳述  
股動(dòng)脈是下肢動(dòng)脈的主干,由髂外動(dòng)脈延續(xù)而來。在腹股溝韌帶中點(diǎn)的深面入股三角。在股三角內(nèi),股動(dòng)脈先位于股靜脈的外側(cè),逐漸從外側(cè)跨到股靜脈的前方,下行入收肌管,再穿收肌腱裂孔至腘窩,易名腘動(dòng)脈。股動(dòng)脈在腹股溝中點(diǎn)處位置表淺,可摸到搏動(dòng),是臨床上急救壓迫止血和進(jìn)行穿刺的部位。動(dòng)脈疾病發(fā)生的一個(gè)主要素是由于血管平滑肌細(xì)胞轉(zhuǎn)變成為了具有繁殖能力的表型。近期的研究表明平滑肌細(xì)胞能表達(dá)鈣離子通道,ICAM-1和CAM-1。其中ICAM-1和CAM-1的表達(dá)可能是造成血管壁炎癥反應(yīng),并進(jìn)一步造成血管疾病的原 。此,對(duì)動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞的體外培養(yǎng)和研究可用來發(fā)現(xiàn)和確定新的血管疾病的靶向治療方法。  
細(xì)胞特性  
1)組織來源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常股動(dòng)脈組織。  
2)細(xì)胞鑒定:平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)免疫熒光染色為陽性。  
3)鑒定細(xì)胞純度高于90%。  
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。  
5)細(xì)胞生長方式:長梭形細(xì)胞,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。  
肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞  
細(xì)胞詳述  
肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞構(gòu)成半選擇性屏障,該屏障對(duì)于肺氣體交換,調(diào)節(jié)液體和可溶物在血液與肺間質(zhì)之間的流動(dòng)具有重要意義。它還具有代謝功能,可以執(zhí)行一定的非呼吸功能。在肺損傷中,肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞是活性氧類的重要靶細(xì)胞之一。在肺炎的發(fā)生過程中,神體液介質(zhì)和氧化劑作用于內(nèi)皮細(xì)胞,使得細(xì)胞間隙滲透性增加,蛋白質(zhì)由血液進(jìn)入間質(zhì)。細(xì)胞間隙滲透性的增加導(dǎo)致低氧血癥,出現(xiàn)成人呼吸窘迫綜合征和非心源性肺水腫。  
細(xì)胞特性  
1)細(xì)胞來源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常肺組織。  
2)細(xì)胞鑒定:血管假性血友病子(WF)免疫熒光染色為陽性  
。  
3)鑒定細(xì)胞純度高于90%。  
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。  
5)細(xì)胞生長方式:上皮樣,多角形細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。

 



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