上海莼試生物技術(shù)有限公司
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上海市
更新時(shí)間:2024-10-06 09:06:36瀏覽次數(shù):33
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產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 組織來源 | 主動(dòng)脈 |
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生長特性 | 貼壁 | 細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 |
換液頻率 | 每2-3天換液一次 | 用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
本產(chǎn)品僅供科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究使用! 不能用于臨床或動(dòng)物診斷!
產(chǎn)品名稱 | 組織來源 | 主動(dòng)脈 | |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 生長特性 | 貼壁 |
細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 | 產(chǎn)品貨號(hào) | CS-X3765 |
細(xì)胞簡介:
兔主動(dòng)脈外膜成纖維分離自主動(dòng)脈血管外膜組織;血管外膜是由疏松結(jié)締組織組成,其中含螺旋狀或縱向分布的彈性纖維和膠原纖維。血管壁的結(jié)締組織細(xì)胞以成纖維細(xì)胞為主,當(dāng)血管受損傷時(shí),成纖維細(xì)胞具有修復(fù)外膜的能力。有的動(dòng)脈中膜和外膜的交界處,有密集的彈性纖維組成的外彈性膜。成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來。成纖維細(xì)胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng),在一定條件下,它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的血管外膜成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細(xì)胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團(tuán);細(xì)胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細(xì)胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細(xì)胞質(zhì)透明,細(xì)胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細(xì)胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。血管外膜成纖維細(xì)胞是血管外膜的主要組成細(xì)胞之一,其主要生理功能合成和釋放細(xì)胞外基質(zhì)以及組織損傷后及時(shí)大量聚集修復(fù)損傷組織。
原代細(xì)胞培養(yǎng)條件:
?溫度?:通常在37℃下進(jìn)行,以模擬體內(nèi)溫度。
?pH值?:培養(yǎng)液的pH值應(yīng)保持在7.2~7.4之間,以維持細(xì)胞的正常生理狀態(tài)。
?氣體環(huán)境?:在含有5% CO2的培養(yǎng)箱中進(jìn)行,以促進(jìn)細(xì)胞生長。
?培養(yǎng)基?:使用含有適當(dāng)營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基,如Eagle's MEM、DMEM等。
?無菌操作?:整個(gè)培養(yǎng)過程需要在無菌條件下進(jìn)行,以防止污染。
方法簡介:
實(shí)驗(yàn)室分離的兔主動(dòng)脈外膜成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
質(zhì)量檢測(cè):
實(shí)驗(yàn)室分離的兔主動(dòng)脈外膜成纖維采用-膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來,細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣
傳代特性:可傳3-5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體操作步驟如下:
?組織處理?:將動(dòng)物組織從機(jī)體中取出,剪碎后用等消化酶處理,使其分散成單個(gè)細(xì)胞。
?細(xì)胞計(jì)數(shù)?:使用血細(xì)胞計(jì)數(shù)器或其他方法對(duì)細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù),確保細(xì)胞密度適中。
?接種培養(yǎng)?:將細(xì)胞懸液接種到培養(yǎng)瓶中,加入適量的培養(yǎng)基,置于37℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
?換液和傳代?:定期更換培養(yǎng)液,當(dāng)細(xì)胞達(dá)到一定密度時(shí)進(jìn)行傳代培養(yǎng),以維持細(xì)胞的生長狀態(tài)。
原代細(xì)胞的4種培養(yǎng)方法:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用
公司正在出售的產(chǎn)品:
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PRDX1重組小鼠 Peroxiredoxin 1 / PRDX1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
Ras相關(guān)C3肉毒菌毒素底物1(Rac1)重組蛋白 Recombinant Ras Related C3 Botulinum Toxin Substrate 1 (Rac1)
C10ORF54重組人 B7-H5 / Gi24 / VISTA 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
IL17F Protein Human 重組人 IL-17F / Interleukin-17F 蛋白 (His 標(biāo)簽)
IL21R Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IL-21R / Interleukin-21 Receptor 蛋白 (His 標(biāo)簽)
兔主動(dòng)脈外膜成纖維細(xì)胞發(fā)動(dòng)蛋白2(DNM2)重組蛋白 Recombinant Dynamin 2 (DNM2)
IL17F Protein Human 重組人 IL-17F / Interleukin-17F 蛋白 (His 標(biāo)簽)
EDA2R重組小鼠 XEDAR / EDA2R 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
IL23R Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IL23R / IL23 Receptor 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
GADD45G重組人 GADD45G / CR6 蛋白 Protein