上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品: 進(jìn)口elisa試劑盒,細(xì)胞株,細(xì)胞系,菌種 |
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- www.bhsy-e.com/
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更新時(shí)間:2022-05-12 15:22:53瀏覽次數(shù):418
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商品屬性:
產(chǎn)品名稱(chēng):人肝動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞
貨號(hào):BJ-X97176
規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
分類(lèi):原代細(xì)胞
商品介紹:
名稱(chēng) 人肝動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡(jiǎn)介: 人肝動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞分離自肝動(dòng)脈組織;在胚胎期,肝臟有3條動(dòng)脈供血,分別來(lái)源于胃左動(dòng)脈、腹腔動(dòng)脈和腸系膜上動(dòng)脈,這3條動(dòng)脈分別的不同部位。出生后,一般保留一條動(dòng)脈,大部分為起源于腹腔動(dòng)脈的動(dòng)脈,由其分出左、右肝動(dòng)脈供應(yīng)左、右半肝。偶爾也可見(jiàn)起源于胃左動(dòng)脈的動(dòng)脈或起源于腸系膜上動(dòng)脈的動(dòng)脈。但也有2條動(dòng)脈并存的情況,如起源于腹腔動(dòng)脈和起源于胃左動(dòng)脈(25%),起源于腹腔動(dòng)脈和起源于腸系臘上動(dòng)脈(10%),而起源于胃左動(dòng)脈和起源于腸系膜上動(dòng)脈的2條動(dòng)脈同時(shí)存在的情況比較少見(jiàn)。此外,還有5%像胚胎期一樣,3條動(dòng)脈同時(shí)存在。這種起源于腹腔動(dòng)脈以外的肝動(dòng)脈稱(chēng)為迷走肝動(dòng)脈,如果肝臟沒(méi)有起源于腹腔動(dòng)脈的動(dòng)脈供血時(shí),此種異位起源的肝動(dòng)脈稱(chēng)替代動(dòng)脈,如果在常見(jiàn)肝動(dòng)脈類(lèi)型外,還有一支這種異位起始的動(dòng)脈的一部分血流,這種肝動(dòng)脈稱(chēng)副肝動(dòng)脈。肝動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞是襯于肝動(dòng)脈內(nèi)表面的單層扁平上皮,在炎癥時(shí)高表達(dá)黏附分子,與血流中白細(xì)胞表面黏附分子相互作用,從而介導(dǎo)白細(xì)胞穿越血管壁,亦屬一類(lèi)非專(zhuān)職抗原提呈細(xì)胞。它們吞噬異物、細(xì)菌、壞死和衰老的組織,還參與集體免疫活動(dòng),包括:①血管收縮及血管舒張,從而控制血壓;②凝血(血栓形成及纖維蛋白溶解);③動(dòng)脈硬化;④血管生成;⑤炎癥及腫脹(浮腫);⑥內(nèi)皮細(xì)胞亦控制一些物質(zhì),如白血球進(jìn)出血管。 5.方法簡(jiǎn)介: 公司實(shí)驗(yàn)室分離的人肝動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞采用混合酶消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過(guò)內(nèi)皮細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測(cè): 公司實(shí)驗(yàn)室分離的人肝動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息: 包被條件 PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%) 培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等 換液頻率 每2-3天換液一次 生長(zhǎng)特性 貼壁 細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣 傳代特性 可傳2-3代 消化液 0.25% 培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5% |
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:產(chǎn)品僅用于科研
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
灰黃青霉 根霉屬的菌 釀酒
皂味口磨 少根根霉 產(chǎn)延胡索酸
宋內(nèi)志賀菌凍干粉 蠟樣芽孢桿菌CMCC63301凍干粉南京便診
成團(tuán)腸桿菌 焦曲霉
羅伊氏乳桿菌 釀酒酵母
大鼠肌紅蛋白(MB)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠肌生成抑制素(MSTN)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠肌酸激酶同工酶MM(CK-MM)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠基質(zhì)金屬-1(MMP-1)elisa檢測(cè)試劑盒
人肝動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞全血2,3-二磷酸甘油酸2,3-DPG測(cè)試盒 50管 比色法
全血蛋白提取試劑盒50T
醛縮酶ALD測(cè)試盒 50管/24樣 比色法
犬17羥孕酮(17-OHP)elisa分析檢測(cè)試劑盒
犬17羥孕酮(17-OHP)elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)
操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過(guò)最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。