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訂購信息：
 產(chǎn)品名稱：NPTII基因核酸檢測試劑盒
規(guī)格：48T  0.2PCR管
編號：BH-P97040
分類：PCR-熒光探針法
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運輸：低溫、避光，快遞免費送貨上門。
產(chǎn)品特點：
◇高特異性：與其他病毒無交叉反應(yīng)，無非特異性擴增；
◇高靈敏度：檢測靈敏度可達10~100拷貝；
◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時進行多個檢測；
◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

準備物品：
清理液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升
稀釋液（C）                                   毫升
溶解液（tD）                                   毫升
產(chǎn)品說明書                                   1份
使用及效果：
PCR反應(yīng)特點
(1) 特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性；
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位)；在細菌學(xué)中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板?？芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。
CTSC Others Human  CTSC / DPPI 細胞裂解液 (陽性對照) 隱綠原酸()Cryptochlorogenic acidHPLC≥98%，

中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);DUKXB11 carrying pDEF202-hTPO-P1鷹嘴豆芽素A()Biochanin AHPLC≥98%，

IL1R1 Others Mouse 小鼠 IL1R1 / CD121a 細胞裂解液 (陽性對照) 鷹嘴豆芽素ABiochanin A>98%,BR

Jurkat(懸浮) 急性T細胞白血病柚皮苷,川陳皮素NaringinHPLC≥98%，

PC-3前列腺癌細胞 Human prostate cancer PC-3 cells F-12培養(yǎng)基+10%FBS羽扇豆醇（）LupeolHPLC≥98%，
胰腺導(dǎo)管上皮細胞Many types of cells　5 × 105方(1ml)8-氟-6-甲氧基莫西沙星美國進口8-Fluoro-6-methoxy Moxifloxacin

EFNB2A Others Danio rerio (zebrafish) 斑馬魚 EFNB2A / Ephrin B2a 細胞裂解液 (陽性對照) (R)-?；?/span>-β-D-葡萄糖苷酸芐基酯美國進口(R)-Naproxen Acyl-β-D-glucuronide Benzyl Ester

大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞;PC-12 [PC12](S)-?；?/span>-β-D-葡萄糖苷酸芐基酯美國進口(S)-Naproxen Acyl-β-D-glucuronide Benzyl Ester

MRC-5細胞，胚肺細胞 大鼠肺上皮Ⅱ型細胞,RLE-6TN細胞 T-109B彈性蛋白酶(含100mL酶解緩沖液)10mL(R)-O-去甲基美國進口(R)-O-Desmethyl Naproxen

SK-OV-3(卵巢癌細胞) 5×106cells/瓶×2莫沙必利美國進口Mosapride
NPTII基因核酸檢測試劑盒CM-R072大鼠腎管狀上皮細胞*培養(yǎng)基100mL硫代基脲25克

小鼠B細胞雜交瘤細胞;SH2 小鼠腸粘膜上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL2,2,2-三拂醇 2,2,2-Trifluoroqthcnol; 72-89-8

MN-c, 小鼠皮質(zhì)神經(jīng)元 Mouse鉀25克RT

KIT Others Mouse 小鼠 c-kit / CD117 細胞裂解液 (陽性對照) 羥脯酸測試盒25支/包

急性T細胞白血病細胞;Jurkat, Clone E6-110203-08-43,5-二錄3,5-Dichloro
檢測步驟：
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照)，每個測試反應(yīng)體系配制如下表：
試劑 每個反應(yīng)加入的量 N個反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
（1） 計算好各試劑的使用量，加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設(shè)定的N個PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液，向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團：設(shè)置為FAM。淬滅基團：NONE，請勿選擇ROX參比熒光。