上海宇淳生物科技有限公司
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參考價 | ¥ 530 |
訂貨量 | 1 |
- 型號 009-500 μL
- 品牌
- 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
- 所在地 上海市
更新時間:2019-04-15 16:08:43瀏覽次數(shù):989
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CelRed 核酸染料(10,000× 水溶液)(效果同GelRed)
中文 | 英文 | 貨號 | 價格 | |
CelRed nucleic acid gel stain *10,000× concentrate in water* | CelRed(效果同GelRed)核酸染料(10,000× 水溶液) | 009-500 μL | 530 | |
009-1mL | 960 | |||
009-2 mL | 1750 |
CelRed 核酸染料(10,000× 水溶液)
特點
● 無毒性:CelRed *的油性和大分子量特點使其不能穿透細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞內(nèi),艾姆斯氏試驗結(jié)果也表明,該染料的誘變性遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于EB。
● 靈敏度高:適用于各種大小片段的電泳染色,對核酸遷移的影響小于SYBR Green I。
● 穩(wěn)定性高: 適用于使用微波或其它加熱方法制備瓊脂糖凝膠;室溫下在酸或堿緩沖液中極其穩(wěn)定,耐光性強(qiáng)。
● 信噪比高:樣品熒光信號強(qiáng),背景信號低。
● 操作簡單:與 EB 一樣,在預(yù)制膠和電泳過程中染料不降解;而電泳后染色過程也只需30 分鐘且無需脫色或沖洗 ,即可直接用紫外凝膠透射儀觀察。
● 適用范圍廣:可選擇電泳前染色(膠染法)或電泳后染色(泡染法);適用于瓊脂糖凝膠或聚丙烯酰胺凝膠電泳;可用于 dsDNA、ssDNA 或 RNA 染色。
● 與EB有相同的光譜特性,無需改變?yōu)V光片及觀察裝置:標(biāo)準(zhǔn)的 EB 濾光片或 SYBR 濾光片都適用,使用與觀察EB相同的普通紫外凝膠透射儀觀察即可,在 300nm 紫外光附近可得到較佳激發(fā)。但是CelRed不能被488 nm氬離子激光器或相似波長的可見光*激發(fā),因此不推薦使用此類激發(fā)裝置的成像系統(tǒng)。對于此類裝置,我們推薦您使用CelGreen(Cat# 011或012),它和SYBR Green I的光譜相似,靈敏度相當(dāng),但更加穩(wěn)定。
CelRed使用方法簡介
1.膠染法(用法同EB)(推薦方法)
(1) 制膠時加入CelRed 核酸染料(例如:每50mL 瓊脂糖溶液中加入5μL CelRed 10,000× 儲液,
以此比例類推)。
(2) 按照常規(guī)方法進(jìn)行電泳。
注意事項:
此方法染色染料用量相對較少。500 μL染料大約可以做100塊 50mL的膠。
由于CelRed具有良好的熱穩(wěn)定性,可以在熱的瓊脂糖溶液中直接添加,而不需要等待溶液冷卻。搖晃,振蕩或者翻轉(zhuǎn)以保證染料充分混勻。也可以選擇將CelRed儲液加到瓊脂糖粉末和電泳緩沖液中,然后用微波爐或其他常用方式加熱以制備瓊脂糖凝膠。CelRed兼容所有常用的電泳緩沖溶液。
如果總是看到條帶彌散或分離不理想,建議使用泡染法染色以確認(rèn)問題是否與染料有關(guān)。如果染色后問題依舊存在,則說明問題與染料無關(guān),請嘗試:降低瓊脂糖濃度;選用更長的凝膠;延長凝膠時間以保證邊緣清晰;改進(jìn)上樣技巧或選擇泡染法染色。
此方法不適合預(yù)制聚丙烯酰胺凝膠,對于聚丙烯酰胺凝膠請使用泡染法。
2.泡染法
(1) 按照常規(guī)方法進(jìn)行電泳。
(2) 用H2O將CelRed 10,000× 儲液稀釋約3,300倍到0.1M NaCl中,制成3× 染色液。(例如將15μL CelRed 10,000× 儲液和5mL 1M NaCl加到45mL H2O中)。
(3) 將凝膠小心地放入合適的容器中,如聚丙烯容器中。緩慢加入足量的3× 染色液浸沒凝膠。室溫振蕩染色30min左右,較價染色時間根據(jù)凝膠厚度以及瓊脂糖濃度不同而略有不同。對于含3.5~10%丙烯酰胺的凝膠,染色時間通常介于30min到1h,并隨丙烯酰胺含量增加而延長。
注意事項:
用泡染法染色時,染料用量較多。單次使用的染色液可重復(fù)使用3次左右。
3× CelRed染色液可以大量制備,在室溫下避光保存直至用完。
幾種核酸染料比較
特別提醒:
如果您使用的是紫外成像儀,請選擇CelRed;如果您使用激光成像儀或希望在可見光下觀測,請選擇 CelGreen。
在極少數(shù)情況下,質(zhì)粒經(jīng)某些酶切后的DNA樣品會出現(xiàn)拖尾和分辨率降低,此時建議同時嘗試兩種染色方法以決定哪種方法更加合適。