操作要點(diǎn)：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過(guò)易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

      描述：(1)公司可提供新鮮或凍存細(xì)胞株；(2)細(xì)胞株數(shù)量約 5×105/瓶；(3)不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基；2、說(shuō)明書(shū)及注意事項(xiàng)；3、公司售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。

      保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮細(xì)胞株，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于臨床應(yīng)用。

注意事項(xiàng)：
1. 接收到細(xì)胞，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過(guò)的）。
3.嚴(yán)格無(wú)菌操作，打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無(wú)菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。

培養(yǎng)步驟：

對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

AluMiniuM hydroxide;Hydrated aluMina;AluMinuM trihydrate酮中烯酰嗎啉溶液（無(wú)證書(shū)）anti- AFM antibody人破傷風(fēng)抗體(Tetanus Ab)ELISA試劑盒

Quinhydrone;Molecular coMp.of p-benzoquinone and hydroquinone;2,5-Cyclohexadiene-1,4-dione coMpd with 1,4-benzene diol(1∶1)酮中噻蟲(chóng)嗪溶液（無(wú)證書(shū)）anti- AFMID antibody人鉤端螺旋體IgM(Lebtospira)ELISA試劑盒

Ethyl benzoate酮中氟啶脲溶液（無(wú)證書(shū)）anti- AFP antibody人鉤端螺旋體IgG(Lep IgG)ELISA試劑盒

2-Naphthol;β-Hydroxynaphthalene;2-Hydroxynaphthalene;Isonaphthol;2-Naphthalenol;C.I.37500酮中蟲(chóng)螨腈溶液（無(wú)證書(shū)）anti- AGA antibody人布魯氏菌抗體IgG(Brucella Ab IgG)ELISA試劑盒

AMMoniuMsulphate酮中嘧菌酯溶液（無(wú)證書(shū)）anti- AGAP2 antibody人水痘帶狀皰疹病IgM(VZV-IgM)ELISA試劑盒

Urea;8-Hydroxyxanthine;2,6,8(1,3,9)-Purinetrione;7,9-Dihydro-1H-purine-2,6,8-(3H)-trione酮中氨基阿維菌素苯酸鹽溶液（無(wú)證書(shū)）anti- AGBL3 antibody人水痘帶狀皰疹病IgG(VZV-IgG)ELISA試劑盒

L-Cysteine Hydrochloride;L(+)-α-AMino-β-thiopropionic acid hydrochloride;L(+)-AMino-α-Mercaptopropionic acid hydrochloride醇中硫威溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)anti- AGBL5/CCP5 antibody人軍團(tuán)菌抗體IgA(LP Ab-IgA)ELISA試劑盒

1,4-Butyrolactone;1,4-Butanolide;1,2-Butanolide;γ-Hydroxybutyric acid lactone;4-Hydroxybutyric acid-γ-lactone醇中硫雙威溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)anti- AGER antibody人軍團(tuán)菌抗體IgM(LP Ab-IgM )ELISA試劑盒

CHL倉(cāng)鼠肺細(xì)胞Human BMP-1 (Bone Morphogenetic Protein 1) ELISA Kit 20號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框26抗體anti- PERLD1 antibody干擾素α(IFNα)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

Human BMP-10 (Bone Morphogenetic Protein 10) ELISA Kit C2CD4D蛋白抗體anti- peroxiredoxin 2 antibody胎蛋白(αFP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

Human BMP-15 (Bone Morphogenetic Protein 15) ELISA Kit 細(xì)胞分裂周期2樣蛋白激酶6抗體anti- peroxiredoxin 2 antibody色素上皮衍生因子(PEDF)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

Human BMP-6 (Bone Morphogenetic Protein 6) ELISA Kit 補(bǔ)體C3IP1抗體anti- peroxiredoxin 2 antibody角蛋白18(KRT18)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

Human BMPR1A (Bone Morphogenetic Protein Receptor, type IA) ELISA Kit周期素依賴性激酶10anti- Peroxiredoxin 3 antibody抗存活素抗體(Anti-Surv)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

Human BMPR2 (Bone Morphogenetic Protein Receptor II) ELISA Kit8號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框86抗體anti- persephin-Specific antibody免疫球蛋白G(IgG)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

Human BSP (Bone Sialoprotein) ELISA Kit周期素依賴性激酶11抗體anti- PES1 antibody白介素2(IL2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

Human MOG (Myelin Oligodendrocyte Glycoprotein) ELISA Kit半胱胺酸蛋白酶蛋白-7抗體anti- PEX1 antibody三酸腺苷(ATP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)