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所 在 地上海市
更新時(shí)間:2020-10-22 08:37:43瀏覽次數(shù):414次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 環(huán)保在線(xiàn)產(chǎn)品描述:公司提供的原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織,公司提供的人源原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來(lái)優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件,以降低雜細(xì)胞的污染,同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下,原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài),進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶(hù)可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類(lèi)型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。公司提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程,保證細(xì)胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿(mǎn)50ml左右*培養(yǎng)基;2、說(shuō)明書(shū)及注意事項(xiàng);3、公司售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用:客戶(hù)可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞,如是新鮮原代細(xì)胞,客戶(hù)收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞,客戶(hù)收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 人食管癌組織源成纖維細(xì)胞 |
規(guī)格 | 5×105 |
貨號(hào) | XG-X6639 |
培養(yǎng)步驟:
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
注意事項(xiàng):
1. 接收到細(xì)胞,肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過(guò)的)。
3.嚴(yán)格無(wú)菌操作,打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無(wú)菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。
操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿(mǎn)37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過(guò)易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
Chlorotriethylsilane小牛胸腺DNA含量標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)anti- DNAJC21 antibody大鼠胰高血糖素樣肽1(Glp-1)ELISA試劑盒
Triethylborane異辛烷中間二氯苯溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)anti- DNAJC27 antibody大鼠膽囊收縮素/腸促肽(CCK)ELISA試劑盒
Triacetin;總膳食纖維標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)anti- DNAJC4 antibody大鼠腦腸肽(BGP/Gehrelin)ELISA試劑盒
Triethylenediamine硅同位素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)anti- DNAJC5B antibody大鼠6酮前列腺素(6-K-PG)ELISA試劑盒
Triethylenetetramine硅同位素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)anti- DNAJC6/AUXILIN antibody大鼠載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA試劑盒
Sodium triacetoxyborohydride敵畏藥溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)anti- DNAJC7 antibody大鼠載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA試劑盒
Triisopropanolamine cyclic borate藥溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)anti- DNAJC9 antibody大鼠25羥基3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA試劑盒
TriisopropylsilanePO43-,SO42-,NO3-,Br-,F(xiàn)-,Cl-混合標(biāo)準(zhǔn)溶液anti- DNAL1 antibody大鼠Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒
人食管癌組織源成纖維細(xì)胞Lasiobolidium orbiculoides Malloch et Benny脂閥結(jié)構(gòu)蛋白1抗體anti- TERF1 antibody節(jié)律晝夜蛋白1(PER1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
Acetobacter pasteurianus subsp.pasteurian ..腫瘤/丸抗原112抗體anti- TERF2 antibodyClock同源物(CLOCK)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
Pholiota squarrosa (Persoon : Fries) Quelet微管動(dòng)力調(diào)節(jié)蛋白FAM82A抗體anti- TERF2IP antibody轉(zhuǎn)膠蛋白(TAGLN)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..FAM50B蛋白抗體anti- TES antibody隱花色素1(CRY1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
Lautropia mirabilis Gerner-Smidt et al.形成素2抗體(成蛋白)anti- TESC antibody配對(duì)框基因9(PAX9)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
Homo sapiens, humanFRMD2蛋白抗體anti- TESPA1 antibody過(guò)還原酶4(PRDX4)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
Curtobacterium flaccumfaciens (Hedges) Coll ..FAM98B蛋白抗體anti- TET2 antibodyX-射線(xiàn)修復(fù)交叉互補(bǔ)蛋白6(XRCC6)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
Streptomyces roseus (Krainsky) Pridham et a ..FAM50C蛋白抗體anti- TEX10 antibodyDNA修復(fù)蛋白R(shí)AD50(RAD50)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
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