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所 在 地上海市
更新時(shí)間:2020-05-24 11:16:06瀏覽次數(shù):353次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 環(huán)保在線104C1細(xì)胞(轉(zhuǎn)化的豚鼠胎體細(xì)胞)
CCC-SMC-1細(xì)胞(兔主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞)
名稱 DT40細(xì)胞(雞淋巴瘤細(xì)胞)
別稱 DT-40; DT 40; DT40B; LSCC-DT40
種屬 雞
年齡(性別) 1日齡
組織來源 法氏囊,淋巴瘤
生長(zhǎng)特性 懸浮細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài) 淋巴母細(xì)胞樣
背景描述 DT40細(xì)胞是Hyline SC雞法氏囊淋巴細(xì)胞株經(jīng)鳥類白血病病毒誘導(dǎo)建株的細(xì)胞系。原始淋巴瘤用羅氏相關(guān)病毒1(RAV-1)感染出生1天的小雞得到,法氏囊中生成的腫瘤制成細(xì)胞懸液后通過靜脈注射輸入同基因型的受體小雞。經(jīng)過一次體內(nèi)移植后,建立了DT40細(xì)胞。DT40細(xì)胞包含的前病毒基因整合在c-myc原癌基因的上游,表達(dá)的c-myc RNA水平較高。DT40細(xì)胞缺少一個(gè)正常c-myc基因,但含有兩個(gè)拷貝ALV去調(diào)控的myc基因。DT40細(xì)胞保留了重排免疫球蛋白輕鏈基因(IgL)的能力。在IgL位點(diǎn),DT40包含一個(gè)重排和一個(gè)胚系同源基因。c-rel基因和v-rel癌基因在DT40細(xì)胞中都能誘導(dǎo)組織相容性(MHC)Ⅱ類抗原表達(dá)。v-rel誘導(dǎo)的MHCⅡ表達(dá)比c-rel誘導(dǎo)快,且其有效性在數(shù)周后達(dá)到c-rel的50倍。DT40細(xì)胞呈淋巴母細(xì)胞表型;傳染性檢測(cè)表明,DT40細(xì)胞釋放低水平的傳染性RAV-1,DT40細(xì)胞株可以用于穩(wěn)轉(zhuǎn)研究。
DT40細(xì)胞(雞淋巴瘤細(xì)胞)生物安全等級(jí) 1
生長(zhǎng)培養(yǎng)基 DMEM(PM150210)+0.05mM β-mercaptoethanol(PB180633)+10% Tryptose Phosphate Broth+5% Chicken Serum+10% FBS(164210-500)+1% P/S(PB180120)
推薦傳代比例 1:3-1:4
推薦換液頻率 2~3次/周
倍增時(shí)間 ~48 hours
凍存條件 凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO溫度:液氮
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%溫度:37℃
保藏機(jī)構(gòu) ATCC; CRL-2111 DSMZ; ACC-636
細(xì)流式檢測(cè)細(xì)胞凋亡的數(shù)據(jù)分析方法:
1) 選中所有顆粒,將FSC和SSC設(shè)置成對(duì)數(shù)坐標(biāo)軸模式備用;
2) 將橫軸和縱軸分別設(shè)成Annexin通道和PI通道(7-AAD與此類似),選取雙陰細(xì)胞群;
3) 在雙陰細(xì)胞門中,將橫軸和縱軸分別設(shè)成FCS和SSC,將數(shù)據(jù)呈現(xiàn)方式改為輪廓圖,找到細(xì)胞碎片,劃出碎片門,應(yīng)用于所有細(xì)胞;
4) 在所有細(xì)胞中,反選碎片門,得到所有細(xì)胞;
5) 將橫軸和縱軸分別設(shè)成Annexin通道和PI通道,參照未經(jīng)藥物處理的對(duì)照組,劃出十字門,確定不同群細(xì)胞的比例。
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