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富爾根染色
一、 實(shí)驗(yàn)步驟
1、石蠟切片脫蠟至水：依次將切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-無(wú)水乙醇Ⅰ5min-無(wú)水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min，自來(lái)水洗。
2、x鹽酸染色：配制1M的鹽酸，置于60℃的烤箱中預(yù)熱。將切片放入已預(yù)熱好的1M的鹽酸中于60℃烤箱中浸染30min，取出切片用常溫的1M鹽酸稍洗一下，蒸餾水洗3遍。
3、雪弗染色：切片入雪弗染液中暗處理60-90min，不水洗；
4、偏重亞硫酸鈉染色：切片直接入偏重亞硫酸鈉浸洗2次，每次2min，流水沖洗5min；
5、固綠染色：切片入固綠染液中10s至2min，無(wú)水乙醇三缸脫水。
6、透明封片：切片入二甲苯Ⅰ5min -二甲苯Ⅱ5min透明，中性樹(shù)膠封片。
7、顯微鏡鏡檢，圖像采集分析。
二、結(jié)果判讀：
核DNA呈紫紅色，細(xì)胞質(zhì)和其他成分呈淡綠色。
三、注意事項(xiàng)：
1、雪弗染色前要用蒸餾水洗干凈，染色時(shí)要避光。
2、固綠染色時(shí)，要邊染邊看，背景不能太深也不能過(guò)淺。
| 細(xì)胞實(shí)驗(yàn) | 細(xì)胞凍存與復(fù)蘇 |
| 細(xì)胞爬片 | |
| 細(xì)胞生長(zhǎng)曲線繪制 | |
| MTT | |
| 穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞系建立 | |
| 細(xì)胞劃痕 | |
| Transwell遷移 | |
| Transwell侵襲 | |
| 流式周期 | |
| 流式凋亡 |
富爾根染色
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