目錄:上海帛科生物技術(shù)有限公司>>生化檢測試劑盒>>光合作用系列>> 半乳糖醛酸含量測試盒可見分光光度法
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更新時(shí)間:2023-12-24 09:45:14瀏覽次數(shù):777評(píng)價(jià)
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貨號(hào) | BK-01S7010 |
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實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。
產(chǎn)品名稱:半乳糖醛酸含量測試盒可見分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格:50管/48樣
檢測方法:可見分光光度法
產(chǎn)品貨號(hào):BK-01S7010
產(chǎn)品分類:光合作用系列
商品介紹:
測定意義: 果膠是一類廣泛存在于植物細(xì)胞壁的初生壁和細(xì)胞中間片層的雜多糖。半乳糖醛酸是果膠酸的組成單位,也是果膠的主要成分,存在于植物的粘液、樹膠和細(xì)菌多糖中。 測定原理 半乳糖醛酸在70℃下與濃硫酸反應(yīng)生成5-甲?;?/span>-2-呋喃甲酸,5-甲酰基-2-呋喃甲酸與3,5-二甲基反應(yīng)產(chǎn)生有色物質(zhì),在450nm下有最大吸光值。 自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器 天平、低溫離心機(jī)、分光光度計(jì)、1mL玻璃比色皿、恒溫水浴鍋、硫酸、蒸餾水。 |
所需的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi)!
1、樣本制備
① 組織樣本: 取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行 勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。 【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進(jìn)行提取
| ② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本: 先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次); 12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。 【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10 4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。 |
注意事項(xiàng):
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。
2、對(duì)照管只需要做一管。
3、若對(duì)照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測定管大于對(duì)照管,對(duì)照管數(shù)值在什么范圍?
對(duì)照管的范圍是0.8-2。對(duì)照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間30min可以延長到40min)。對(duì)照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測定管大于對(duì)照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測,通常可以使測定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。
250mL Formalin-Zinc Acetate Solution Formalin-Zinc Acetate Solution 常溫保存
5次 天凈沙非同位素探針雜交試劑盒(適用Oligo探針) Nonradioactive Probe Hybridization Kit 雜交液-20℃保存,其余成分常溫
2 ug pISRE-TA-Luc pISRE-TA-Luc 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
50次 脈沖電泳Marker(低范圍PFG)
1瓶 CL-187[LS180]細(xì)胞株 CL-187[LS180] 低溫運(yùn)輸和保存
R2A瓊脂 R2A Agar 250g
4mg 神經(jīng) ( 梭菌 ) Neuraminidase 4℃保存
100mL TE Buffer,50X,pH7.6 TE Buffer,50X,pH7.6 常溫保存
50次 化蛋白純化試劑盒
2 ug pSPL3 pSPL3 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
1.5mL 非DNA清除劑 DNA Erasol 4℃保存
半乳糖醛酸含量測試盒可見分光光度法phospho-MAP3K7IP1(Thr431) 磷酸化轉(zhuǎn)化生因子β活化激結(jié)合蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml
BCAT2/BCAM 支鏈氨基酸轉(zhuǎn)氨2抗體 規(guī)格: 0.1ml
CD158e NK細(xì)胞抑制性受體3DL1抗體 規(guī)格: 0.2mlPCDHGC5 原鈣粘蛋白γC5抗體 規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-human IgG F(ab')2/FITC FITC標(biāo)記的兔抗人IgG F(ab')2 規(guī)格: 0.1mlDPH2 白喉酰胺生物合成樣蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2ml
Phospho-TrkA (Tyr674/675)/TrkB (Tyr706/707) 磷酸化酪激A抗體 規(guī)格: 0.1mlFSP/Spastin 纖維母細(xì)胞表面蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml
C10orf30/BEND7 10號(hào)染色體開放閱讀框30抗體 規(guī)格: 0.2mlCDC34B/UBC3B 泛素載體蛋白R(shí)2抗體 規(guī)格: 0.2ml
Lubricin/SZP 淺表層粘膜蛋白多糖抗體 規(guī)格: 0.2mlUVRAG/DHTX 輻射耐受相關(guān)蛋白DHTX抗體 規(guī)格: 0.2ml
Phospho-Tie2 (Ser1119) 磷酸化管生成素受體2抗體 規(guī)格: 0.1mlPhospho-RIP2 (Ser176) 磷酸化受體結(jié)合絲蘇激2抗體 規(guī)格: 0.1ml
Cyclin B1 周期素B1抗體 規(guī)格: 0.1mlMaspin 抑基因抗體 規(guī)格: 0.1ml
CDC37 Hsp90輔助伴侶分子CDC37抗體 0.1mlCyclin G 周期素G抗體 規(guī)格: 0.1ml
Goat Anti-human IgM/Bio 標(biāo)記的羊抗人IgM 規(guī)格: 0.1mlRabbit Anti-human sIgA/RBITC 羅丹明標(biāo)記的兔抗人分泌型IgA 規(guī)格: 0.1ml
phospho-RUNX1(Ser266) 磷酸化急性髓細(xì)胞白1蛋白抗體 規(guī)格: 0.1mlER-Alpha 雌激素受體α抗體 規(guī)格: 0.1ml
(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)