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目錄:上海帛科生物技術(shù)有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒>>蛋白含量測(cè)定系列>> 白蛋白含量測(cè)試盒微量法

白蛋白含量測(cè)試盒微量法
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更新時(shí)間:2023-12-24 13:39:59瀏覽次數(shù):787評(píng)價(jià)

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同類(lèi)優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品

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貨號(hào) BK-01S6970
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實(shí)驗(yàn)方法學(xué):

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱(chēng)取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱(chēng)之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱(chēng)之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

選擇抗凝的注意點(diǎn):

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

用于測(cè)定。

特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。

產(chǎn)品名稱(chēng):白蛋白含量測(cè)試盒微量法

產(chǎn)品規(guī)格:100管/96樣

檢測(cè)方法:微量法

產(chǎn)品貨號(hào):BK-01S6970

產(chǎn)品分類(lèi):蛋白含量測(cè)定系列
商品介紹:

測(cè)定意義:

白蛋白由肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞合成,在血漿蛋白中含量最多,具有重要的生理功能,包括維持膠體滲透壓,并可與長(zhǎng)鏈脂肪酸、膽汁酸、血紅素、鈣和鎂離子等物質(zhì)結(jié)合。它擁有抗氧化性和抗凝血性,能充當(dāng)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和藥物的運(yùn)輸載體,同時(shí)也是血漿PH值的緩沖劑。血清白蛋白含量直接關(guān)系到肝臟疾病、腎臟疾病、營(yíng)養(yǎng)不良或蛋白流失性腸道病癥的發(fā)生發(fā)展,是臨床檢測(cè)的一個(gè)重要指標(biāo)。

測(cè)定原理

白蛋白在pH4.2的緩沖液中帶正電荷,可與帶負(fù)電荷的染料溴甲酚綠結(jié)合形成藍(lán)綠色復(fù)合物,在波長(zhǎng)630nm處有吸收峰,在一定范圍內(nèi)其顏色深淺與白蛋白濃度成正比例。

需自備的儀器和用品

可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、蒸餾水。

所需的儀器和用品:

可見(jiàn)分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的測(cè)定:

建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)

樣本和試劑浪費(fèi)!

1、樣本制備

組織樣本:

取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行

勻漿(或使用各類(lèi)常見(jiàn)勻漿器)4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測(cè)液。

【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10 的比例進(jìn)行提取

 

細(xì)菌/細(xì)胞樣本:

先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL

提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);

12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。

【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10

4):提取液(mL)為 500~10001 的比例進(jìn)行提取。 液體樣本:直接檢測(cè);若渾濁,離心后取上清檢測(cè)。

QQ截圖20220307153537.png 

注意事項(xiàng):

1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。

2、對(duì)照管只需要做一管。

3、若對(duì)照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。

4、SOD為什么有的樣本測(cè)定管大于對(duì)照管,對(duì)照管數(shù)值在什么范圍?

對(duì)照管的范圍是0.8-2。對(duì)照管吸光值過(guò)低可能是(1)試劑二或試劑四沒(méi)有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒(méi)有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間30min可以延長(zhǎng)到40min)。對(duì)照管吸光值過(guò)高可能是試劑二未按操作說(shuō)明書(shū)稀釋相應(yīng)倍數(shù)。

若出現(xiàn)測(cè)定管大于對(duì)照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測(cè),通??梢允箿y(cè)定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。

25U β -瓊脂糖 β-Agarase -20℃保存

100mL TE Buffer,50X,pH7.4 TE Buffer,50X,pH7.4 常溫保存

1 管 LBA4404農(nóng)桿菌 LBA4404 Agrobacterium Strain -80℃保存

2 ug pSilencer 3.0-H1 pSilencer 3.0-H1 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

1次 96孔板病毒RNAout(真空法)  

2 ug pCMV-Gag-pol pCMV-Gag-pol 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

快速硫化氫試驗(yàn)瓊脂 H2S Test Medium Agar 250g

2 ug pCAMBIA2300 pCAMBIA2300 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

50T 人核糖核酸P基因PCR測(cè)定試劑盒  低溫運(yùn)輸,-20℃保存

5 mg Brefeldin A (蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)抑制劑) Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存

250mL Citrate Buffer(檸檬酸鹽緩沖液),0.5M,pH2.5   Citrate Buffer,0.5M,pH2.5   常溫保存

白蛋白含量測(cè)試盒微量法IL-22R  白介素-22受體抗體 規(guī)格: 0.1ml

REM/GTP binding protein REM1  GTP結(jié)合蛋白R(shí)EM1抗體 規(guī)格: 0.2ml

Cystatin E/M  半胱蛋白抑制劑6抗體 規(guī)格: 0.1ml

Phospho-SRF (Ser77)   磷酸化生激素釋放因子抗體(清應(yīng)答因子) 規(guī)格: 0.1ml

BCCIP/TOK1  易基因2和p21蛋白抑制因子抗體 規(guī)格: 0.2ml

HA tag  HA tag標(biāo)簽抗體 規(guī)格: 0.1ml

Phospho-IRF3 (Ser396)  磷酸化干擾素調(diào)節(jié)因子3 規(guī)格: 0.1ml

AKR1D1  醛固酮還原家族1成員D1抗體 規(guī)格: 0.2ml

CARPX/CA10  碳酸酐相關(guān)蛋白抗體(腦蛋白15) 規(guī)格: 0.1ml

Phospho-EEF2k (Ser366)  磷酸化真核延伸因子激2抗體 規(guī)格: 0.1ml

alpha Actinin 4  α-輔肌動(dòng)蛋白4抗體 0.2ml

RelB  核轉(zhuǎn)錄因子NFKB-RelB蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml 

 


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