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FV3000 激光掃描共聚焦顯微鏡

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更新時間：2023-05-06 17:35:06瀏覽次數(shù)：226次

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產品簡介

FLUOVIEW FV3000系列激光掃描共聚焦顯微鏡能夠解決一些現(xiàn)代科學艱巨的挑戰(zhàn)。FV3000共聚焦顯微鏡具有活細胞成像和深層組織觀察所需的高靈敏度和高速度。

詳細介紹

詳細信息

針對科學領域推出的新一代FLUOVIEW系統(tǒng)

FLUOVIEW FV3000系列激光掃描共聚焦顯微鏡能夠解決一些現(xiàn)代科學艱巨的挑戰(zhàn)。FV3000共聚焦顯微鏡具有活細胞成像和深層組織觀察所需的高靈敏度和高速度，能夠實現(xiàn)包括從宏觀到微觀成像、超分辨率顯微觀察和定量數(shù)據(jù)分析在內的多種成像方式。在正置式和倒置式顯微鏡鏡架之間選擇適合包括發(fā)育生物學、干細胞研究、電生理、腫瘤研究、載玻片成像等在內的多種生命科學應用的一款。
 

TruSpectral全真光譜高靈敏度多通道成像

采用的光譜檢測技術的FV3000共聚焦顯微鏡的TruSpectral全真光譜檢測器將高靈敏度與光譜靈活性集于一體，可以檢測微弱的熒光團。

  • 透光率是傳統(tǒng)光譜檢測技術的三倍
  • 可獨立調整的通道能夠優(yōu)化每個熒光團的信號檢測
  • λ掃描模式可對復雜重疊熒光信號進行準確的光譜拆分
  • 濾色片（VBF）模式可同時進行四通道圖像采集，在虛擬通道模式下最多可進行十六通道的熒光采集

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TruSpectral全真光譜高靈敏度多通道成像

從宏觀到微觀成像和超分辨率顯微鏡

FV3000顯微鏡的從宏觀到微觀工作流程提供了數(shù)據(jù)采集路線圖，讓您能夠在背景中查看數(shù)據(jù)并輕松定位感興趣區(qū)域進行高分辨率成像。

  • 使用低倍率1.25倍或2倍物鏡快速拍攝整體標本的大視場（FOV）圖像
  • 在拼接圖像上找到感興趣的區(qū)域，然后利用奧林巴斯超高分辨率技術（FV-OSR）切換到更高放大倍率物鏡進行低至120納米的高分辨率共聚焦成像
  • 通過TruSight圖像處理完成采集，并獲得可隨時發(fā)布的顯微圖像

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Macro-to-Micro Imaging and Super Resolution Microscopy

半個冠狀小鼠腦片在顯微鏡下拍攝的圖，二抗標記的是GFP（Alexa Fluor 488，綠色）、SV2（Alexa Fluor 565，紅色）、Homer（Alexa Fluor 647，藍色）。
示例由麻省理工學院Ed Boyden博士和Chen Fei博士提供。

Macro-to-Micro Imaging and Super Resolution Microscopy

樹突（Anti-GFP抗體 Alexa Fluor 488，綠色）和突觸標記（SV2，Alexa Fluor 565，紅色）。利用cellSensCI反卷積功能處理的奧林巴斯超級分辨率圖像。測量獲得半波峰寬約為135nm。使用100X 1.35 NA硅油物鏡獲取的圖像。
示例由麻省理工學院Ed Boyden博士和Chen Fei博士提供。

 

混合掃描可實現(xiàn)高速成像以及更高的出圖率

FV3000混合掃描單元將兩套掃描振鏡合二為一，提升共焦成像功能。

  • FV3000RS混合掃描單元利用常規(guī)掃描振鏡用于高精度掃描，同時有共振掃描振鏡對實時生理現(xiàn)象進行高速成像
  • 使用共振掃描振鏡以大視場捕獲視頻速率的圖像，速度可從全視場FN 18的每秒30幀/秒，一實現(xiàn)每秒438幀/秒（fps）
  • 使用共振掃描振鏡觀察諸如心臟跳動、血液流動或細胞鈣離子（Ca2 +）動態(tài)等快速現(xiàn)象
  • 一鍵切換高精度的常規(guī)掃描振鏡和高速度的共振掃描振鏡

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精確的時間序列成像

時間序列成像實驗需要對樣品進行持續(xù)聚焦以及低光毒性。

  • 奧林巴斯的TruFocus模塊即便溫度變化或添加試劑也可確保在活細胞成像過程中保持在焦
  • FV3000顯微鏡的高靈敏度檢測器所要求的激光功率大幅度降低，配合共振振鏡減少每個點的曝光時間，從而在減少更多光毒性的同時得到更精確的圖像數(shù)據(jù)

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利用硅油物鏡進行深層組織觀察

硅油的折射率接近于活組織的折射率，因此能夠以小球差進行活組織內部的深度高分辨率觀察。

  • 折射率匹配提供了更準確的聚焦，實現(xiàn)了大體積生物體的高還原度的三維重構和高分辨率共聚焦成像
  • 長工作距離可實現(xiàn)深層的顯微成像
  • 實時查看數(shù)據(jù)，并使用3D重構軟件輕松觀察結構

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經透明化處理的小雞睫狀神經節(jié)3D圖像。 
圖片數(shù)據(jù)由Ryo Egawa博士提供。日本東北大學生命科學研究生院。

TruSpectral全真光譜檢測

與上一代的光譜檢測單元相比， TruSpectral全真光譜檢測技術能夠呈現(xiàn)更為出色的結果。FV3000顯微鏡各通道均采用了將光譜檢測器的靈活性與基于濾色片的靈敏度相結合的TruSpectral全真光譜檢測技術。
 
 
 
 
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靈敏度和準確性

更高的量子效率

TruSpectral全真光譜檢測技術的工作原理

基于高效率的技術體相位全息（VPH）透射光柵，TruSpectal全真光譜檢測技術配合可調狹縫可實現(xiàn)2nm的光譜檢測。

靈敏度和準確性

與傳統(tǒng)光譜檢測單元相比， FV3000系列共聚焦顯微鏡均配備的TruSpectral全真光譜檢測技術實現(xiàn)更高的光通量。體相位全息透射光柵能夠以比反射光柵高三倍的透射效率來衍射光線。由此最終獲得出色的活組織和固定組織多色熒光顯微圖像。

更高的量子效率

FV3000顯微鏡的高靈敏度檢測器（HSD）讓您能夠采集到常規(guī)檢測器無法檢測到的微弱熒光信號。HSD單元采用兩個量子效率45％的GaAsP檢測器，并通過Pilter固體制冷技術在極低激發(fā)光下將圖像背景噪聲降低20％。HSD單元可配合FV3000系統(tǒng)實現(xiàn)四通道GaAsP成像。

 

 

原始信號

 
 
  

多達十六通道光譜TruSpectral檢測

TruSpectral全真光譜檢測可在所有顯微鏡通道上獨立工作，因此能夠在多達四個通道上實現(xiàn)真正的多通道同時λ掃描。多通道λ模式有助于實現(xiàn)實時和實驗后處理光譜拆分由此獲得出色的光譜分離結果。在多達四個動態(tài)范圍的條件下，可單獨調節(jié)每個檢測器的靈敏度實現(xiàn)明亮和暗淡信號的分離。

光譜拆分

FV3000系統(tǒng)的光譜反卷積算法讓重疊光譜能夠基于來自λ序列圖像的光譜信息進行分離。在實時圖像采集和采集后處理過程中，可以通過拆分算法消除通道之間的熒光串擾，從而清晰分離多達16個熒光信號。

光譜拆分

使用多通道λ序列圖像對用YOYO-1、Alexa Fluor 488、羅丹明-鬼筆環(huán)肽和MitoTracker Red標記的PtK2細胞進行光譜拆分。
 
 
 
 
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血小板與小鼠血管中的血栓結合。通過配有2 CH GaAsP PMT的共振振鏡以全幀30 fps拍攝的圖像。
圖像數(shù)據(jù)由以下人員提供：京都大學生命科學研究院Takuya Hiratsuka博士、Michiyuki Matsuda博士。

兩種掃描振鏡模塊

可在兩種掃描單元之間選擇：常規(guī)掃描振鏡（FV3000）或混合的常規(guī)/共振掃描振鏡（FV3000RS）。

  • 利用常規(guī)掃描振鏡和奧林巴斯超分辨率技術（FV-OSR）以高信噪比獲得低至120納米分辨率的圖像
  • 常規(guī)振鏡掃描單元可提供精準的龍卷風掃描模式和多點刺激功能，而且刺激與成像切換僅需100ms
  • 混合式掃描單元既配有用于高精度掃描的常規(guī)掃描振鏡，也配有用于高速成像的共振掃描振鏡
  • 共振掃描振鏡讓您能夠以512×512像素全視場每秒捕捉30幀圖像，或者通過剪切Y軸以每秒438幀速度捕獲關鍵的實時生物電生理現(xiàn)象，如鈣離子信號的檢測。

兼顧速度和視場數(shù)

很多高速掃描方法受制于成像視野，從而限制了檢查多細胞大視野的能力。FV3000RS顯微鏡的共振掃描振鏡即便在每秒30幀的視頻速率下也可能保持FN 18的全視場成像，可實現(xiàn)每秒438幀采樣。

循環(huán)平均化降噪處理

直觀的軟件

FV3000軟件簡化了從采集到分析的整個共聚焦成像及分析工作流程?？啥ㄖ魄铱杀４娴牟季衷O置讓您無論復雜程度如何，均可輕松根據(jù)工作流程和實驗需求自定義界面。

直觀的軟件

表達Fucci的HT29細胞系球體圖像

表達Fucci的HT29細胞系球體圖像
圖像數(shù)據(jù)由以下人員提供：Yuji Mishima博士，Kiyohiko Hatake博士日本癌癥研究基金會癌癥化學治療中心臨床化學治療組。

實時3D重構

利用FV3000軟件的實時3D圖像渲染功能并實時查看您的數(shù)據(jù)。3D圖像可在圖像采集期間進行構建并以實時圖像方式顯示。

多位點延時和微孔板成像

多位點延時（MATL）模塊通過對電動載物臺移動的精確控制獲得強大而準確的時間序列數(shù)據(jù)，讓您能夠生成方便查看相關數(shù)據(jù)的細節(jié)概覽顯微圖像。將MATL模塊與多孔板導航器模塊配合使用，可利用不同細胞培養(yǎng)容器和定制微孔板的精密直觀的控制實現(xiàn)更多功能。

多位點延時和微孔板成像

利用時序管理器簡化實驗復雜性

時序管理器軟件模塊可輕松處理復雜的科學實驗。多天時間序列實驗以微秒級掃描精度和毫秒級序列執(zhí)行精度進行控制?？蓤?zhí)行各種復雜實驗方案，其中包括：

  • 在高低倍率物鏡之間切換
  • 不同間隔的時間序列成像
  • FRAP或FRET（受體漂白法）成像過程中進行光刺激
利用時序管理器簡化實驗復雜性

顯微圖像定量分析

FV3000共聚焦顯微鏡可增加一套可選配的分析功能來完成成像工作流程并提供定量數(shù)據(jù)。

  • 計數(shù)和測量：計算細胞的數(shù)量、大小、光強和形態(tài)
  • 共定位：分析重疊熒光光譜

計數(shù)和測量

計數(shù)和測量
樣品由以下人員提供：德島大學藤井醫(yī)學研究院Hidetaka Kosako

共定位

共定位

FRET和FRAP實驗

FV3000顯微鏡與cellSens生命科學分析模塊配合使用，可輕松獲取及分析FRET和FRAP實驗。

  • 在FRAP實驗中，τ/ 2和移動/靜止部分，可以通過擬合漂白后熒光恢復引起的亮度變化曲線來進行估算。
  • FRET效率的測量可以通過受體漂白法、比例成像法和敏化發(fā)射法來實現(xiàn)。

FRET分析示例（受體光漂白）
 
 
 

FRET分析示例（受體光漂白）

FRAP分析示例

比例成像和強度調節(jié)顯示（IMD）

FV3000的比例成像分析軟件具有強度調節(jié)顯示（IMD）功能，在標準速度或高速采集時，實時顯示熒光定量比例圖像的變化過程。該功能對于測鈣和FRET成像特別有用，可以增強信號對比度。
 

CCCP處理前

 
 
 

Hela 細胞中tsGFP1-mito表達量的變化體現(xiàn)線粒體產熱過程的蛋白質變化。
表達tsGFP1-有絲分裂表達細胞37°C（98.6°F）經CCCP處理前后的比例圖像（405nm激發(fā)/488nm激發(fā)）。比例尺指示為10μm（整個圖像）和3μm（插圖）。
圖像數(shù)據(jù)由京都大學合成化學與生物化學系分子生物學領域Shigeki Kiyonaka博士、Yasuo Mori博士提供。
 

（左）CFP，（右）YFP FRET

 
 
 

心肌細胞
圖片數(shù)據(jù)由RIKEN腦科學研究所細胞功能動力學Yusuke Niino和Atsushi Miyawaki博士提供。

 

細胞強度隨時間的變化
細胞強度隨時間的變化
 
 
 
 

從Bmal1：luc穩(wěn)定轉染ES細胞的第12天，RA誘導分化細胞的生物發(fā)光
圖像數(shù)據(jù)由以下人員提供：Kazuhiro Yagita，醫(yī)學博士京都府立醫(yī)科大學生理與系統(tǒng)生物科學系
參考文獻：Proc Natl Acad Sci U S A. 107(8)：3846–3851 (2010)

目標追蹤

使用cellSens目標追蹤模塊自動檢測、追蹤和分析延時圖像中的運動對象。追蹤功能提供了強大直觀的工具來量化諸如細胞移動和分裂等動態(tài)過程。

遠程開發(fā)（RDK）模塊

遠程開發(fā)模塊可使用Python、C ++和Matlab等語言對特定FV3000顯微鏡功能進行遠程控制和編程。RDK模塊能夠發(fā)揮系統(tǒng)所蘊含的更大潛力，是具有編程經驗用戶的強大工具。

 遠程開發(fā)（RDK）模塊

選擇適合您應用的配置

Inverted microscope

倒置顯微鏡

  • 適用于觀察容器中培養(yǎng)的細胞
  • TruFocus單元以穩(wěn)定的聚焦進行長時間觀察
  • 可配置載物臺式孵育小室或全封閉培養(yǎng)箱以維持培養(yǎng)細胞的環(huán)境條件

Upright microscope (configured for slide imaging)

正置顯微鏡（成像型配置）

  • 針對固定組織切片和載玻片標本觀察進行優(yōu)化
  • 電動7孔位物鏡轉盤和聚光鏡可實現(xiàn)從宏觀到微觀觀察的低高倍物鏡的自由切換

Upright microscope (configured for electrophysiology)

正置顯微鏡（電生理型配置）

  • 物鏡周圍具有可輕松安裝膜片鉗等電生理設備的足夠空間
  • 通過降低載物臺高度為拍攝大體積樣本預留額外空間
  • 搖擺式和滑入式物鏡轉換器可以在不影響膜片鉗的設置條件下，自由切換物鏡

組件

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FV3000 IO接口盒

FLUOVIEW激光掃描共聚焦顯微鏡解決方案
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FV3000 主激光耦合器和副激光耦合器

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FV3000光譜檢測器

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FV3000透射檢測器

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FV3000高靈敏度光譜檢測器

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軟件

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FV3000多位點延時軟件模塊

FLUOVIEW激光掃描共聚焦顯微鏡解決方案
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FV3000多點和地圖光刺激軟件模塊

FLUOVIEW激光掃描共聚焦顯微鏡解決方案
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FV3000超分辨率模塊

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FV3000遠程開發(fā)模塊

FLUOVIEW激光掃描共聚焦顯微鏡解決方案
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Scanners

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FV3000常規(guī)掃描單元

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FV3000混合掃描單元

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應用資料(14)

Dynamic Volumetric Imaging with the FV3000RS Confocal Microscope: 3D Reconstruction of Actin Dynamics in a Colletotrichum graminicola Spore
 
Observing a Vascularized Tumor Spheroid on a Chip with a Confocal Microscope
 
Perform Accurate and Efficient Microscopy Image Analysis Using TruAI based on Deep Learning
 
使用FV3000激光掃描共聚焦顯微鏡通過大視野成像尋找主動脈瓣特殊細胞并觀察其精細結構
 
FV3000共聚焦顯微鏡和X Line 40X油浸物鏡對骨細胞相互作用進行高分辨率成像
 
FV3000共聚焦多色熒光成像
 
FV3000共聚焦顯微鏡觀察脛骨骨端中的精細神經血管結構
 
FV3000共聚焦顯微鏡對經透明化處理的小鼠肝臟進行3D觀察
 
FV3000共聚焦顯微鏡實現(xiàn)DNA修復蛋白可視化
 
FV3000共聚焦顯微鏡對細胞球三維延時成像：抗體依賴性細胞介導的細胞毒性作用（ADCC）48小時連續(xù)觀察
 
全新Fucci（CA）蛋白：用于細胞周期可視化的熒光探針
 
Use of Low Chromatic Aberration Objective PLAPON60XOSC for Quadruple Immunofluorescence of Brain Tissue
 
Using silicone immersion objectives with a confocal laser scanning microscope for deep tissue observation in cleared specimens
 
Tackling diabetes with confocal microscopy
 

書籍(1)

Novel Insights into the Glia Limitans of the Olfactory Nervous System
 

目錄(3)

簡介：FLUOVIEW應用技術
 
激光掃描共聚焦顯微鏡FV3000
 
應用導向的物鏡
 

視頻(26)

FLUOVIEW™ FV3000 Microscope Basic Start-Up Procedure
 
FV3000: Flow of fluorescent beads inside blood vessels and tumor spheroids constructed on a microfluidic device
 
FV31S-SW imageprocessing: Spectral Deconvolution
 
FV31S-SW imageprocessing: Projection, cropping & exporting
 
 展示更多內容

在線會議(3)

3D Assays: Intelligent Software, Insightful Analyses
 
Multiplexing and Deep Tissue Imaging with Near-Infrared Confocal Laser Scanning Microscopy
 
Olympus Deconvolution – Technologies for Enhancing Image Resolution
 

白書(1)

Image Processing with Deconvolution

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