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上海閃晶分子生物科技有限公司
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更新時間:2023-05-09 13:45:59瀏覽次數(shù):207次
聯(lián)系我時,請告知來自 環(huán)保在線SYBR Green II主要用于RNA和單鏈DNA電泳。是EB和替代品,無致癌性,超敏感性。用作常規(guī)電泳時,須將商品化的核酸MARKER作一定倍數(shù)的稀釋(1/5-1/10),這樣才能得到比較理想結(jié)果。
10000×Sybr Green II核酸染料
SYBR Green II主要用于RNA和單鏈DNA電泳。是EB和替代品,無致癌性,超敏感性。用作常規(guī)電泳時,須將商品化的核酸MARKER作一定倍數(shù)的稀釋(1/5-1/10),這樣才能得到比較理想結(jié)果。
產(chǎn)品特點:
● 無毒性:屬花箐類染料,容易生物降解,無致癌毒性。
● 靈敏度高:至少可檢出20pg ssDNA或RNA,高于EB染色法25~100倍。
● 信噪比高:樣品熒光信號強,背景信號低。
● 操作簡單:與EB一樣,在預(yù)制膠和電泳過程中染料不降解;而電泳后染色過程也只需30分鐘且無需脫色或沖洗,即可直接用紫外凝膠透射儀或可見光透射儀觀察。
● 適用范圍廣:可選擇電泳前染色(膠染法)或電泳后染色(泡染法);適用于瓊脂糖凝膠電泳、聚丙烯 酰胺凝膠電泳、脈沖電場凝膠電泳和毛細(xì)管電泳等;可用于 ssDNA 或 RNA 染色。
● 使用方便:對分子生物學(xué)中常用的酶(如:Taq 酶、反轉(zhuǎn)錄酶、內(nèi)切酶、T4連接酶等)沒有抑制作用。
● 經(jīng)濟:價格比銀染便宜。
編號 | 規(guī)格 | 售價¥ | 說明書下載 |
RF026 | 100ul | 800.00 | Sybr Green II熒光染料 |
使用方法:
1.膠染法(用法同EB)(推薦方法)
(1) 熔膠后,冷卻膠至50℃左右,加入Sybr Green II 核酸染料。每100mL膠中加入3~5μL Sybr Green II 10,000× 儲液,以此比例類推。
(2) 按照常規(guī)方法進(jìn)行電泳。
注意事項:
(1) 此方法染色可以準(zhǔn)確確定核酸片段分子量,染料用量相對較少。1mL染料大約可以做300塊 100mL的膠。
(2) 由于Sybr Green II熱穩(wěn)定性較差,不能在熱的膠溶液中直接添加,需要等待溶液冷卻至50℃左右才能添加。搖晃,振蕩或者翻轉(zhuǎn)以保證染料充分混勻。
2.泡染法
(1) 按照常規(guī)方法進(jìn)行電泳。
(2) 用pH 7.0~8.5 的緩沖液(如:TAE,TBE 或 TE),按照10000﹕1的比例稀釋Sybr Green II 10,000× 儲液,混勻,制成1× 染色液。
(3) 將凝膠小心地放入合適的容器中,如聚丙烯容器中。緩慢加入足量的1× 染色液浸沒凝膠。用鋁箔等蓋住容器使染料避光。室溫振蕩染色10~30分鐘,染色時間因凝膠濃度和厚度而定。聚丙烯酰胺凝膠直接在玻璃平皿上染色,將配好的1× 染色液輕輕地倒在膠板上,讓其均勻地覆蓋整個膠板,并染色30分鐘。玻璃平皿必須預(yù)先經(jīng)過硅烷化溶液處理(避免染料吸附在玻璃表面上)。
注:用泡染法染色時,可以精確確定核酸片段分子量。但染料用量較多。
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