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上海閃晶分子生物科技有限公司
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更新時(shí)間:2023-05-10 09:24:08瀏覽次數(shù):144次
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RNasin 是從人胎盤(pán)中提取的特異性RNA酶抑制劑,分子量為 51,000 道爾頓的蛋白質(zhì),等電點(diǎn) pH 值為 4.7 。它能特異地與 RNase 以 300 的抑制常數(shù) (ki) 以非共價(jià)鍵結(jié)合形成復(fù)合體而使 RNase 失去活性。
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RNA酶抑制劑概述
RNasin 是從人胎盤(pán)中提取的特異性RNA酶抑制劑,分子量為 51,000 道爾頓的蛋白質(zhì),等電點(diǎn) pH 值為 4.7 。它能特異地與 RNase 以 300 的抑制常數(shù) (ki) 以非共價(jià)鍵結(jié)合形成復(fù)合體而使 RNase 失去活性。在緩沖液為 0 -0.5M NaCl , pH5-8 的條件下保持其活性, pH7.8 時(shí)活性高。經(jīng)嚴(yán)格質(zhì)量檢驗(yàn),該產(chǎn)品為電泳純,無(wú) RNase 、 Nickase 污染,比活為 100,000 單位 / 毫克蛋白,達(dá)到國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)。
RNA酶抑制劑特性
1. 抑制一般的真核 RNase 包括 RNaseA 、 B 、 C 和人胎盤(pán) RNase ;
2. 不抑制 RNase H , S1 核酸酶, SP6 , T7 和 T3 RNA 聚合酶, AMV 或 M-MLV 反轉(zhuǎn)錄
酶, Taq DNA 聚合酶, RNase T1 ;
3. 活性 pH 范圍寬廣,但需要 1mM DTT 以保持其活性。
RNA酶抑制劑應(yīng)用
1. 用在有潛在 RNase 污染的地方。
2. 在 cDNA 合成中保護(hù) mRNA 。
3. 體外轉(zhuǎn)錄系統(tǒng)、翻譯系統(tǒng),保護(hù) mRNA 。
4. 用于多核糖體的活性、產(chǎn)量增加。
5. 增進(jìn)體外病毒復(fù)制。
6. 促進(jìn)同源體系中的 RNA 翻譯。
7. 制備無(wú) RNase 的抗體。
8. 提高 Riboprobe (R) 系統(tǒng) RNA 合成反應(yīng)的得率。
濃度 20-40u/ul 。
RNA酶抑制劑單位定義
抑制 5ng RNase A 活性的 50 %所需酶量為一單位。
儲(chǔ)藏緩沖液
20mM HEPES-KOH pH7.6, 50mM KCl, 8mM DTT, 50% 甘油。
RNA酶抑制劑對(duì)核酸酶的選擇性抑制
抑制 | 不抑制 |
RNase A | RNase T1 |
RNase B | S1 核酸酶 |
RNase C | 從曲霉屬中提出的 Rnase |
RNA酶抑制劑的性質(zhì)
活性 | 通過(guò)與酶分子非共價(jià)結(jié)合抑制 RNase 活性 |
抑制類(lèi)型 | 競(jìng)爭(zhēng)性抑制 |
結(jié)合常數(shù) | Ki=4.4×1014 |
與 RNaseA 結(jié)合比例 | 1:1 |
分子量 | 51,000 道爾頓 |
等電點(diǎn) | pH4.7 |
自由巰基 | 30 |
pH 的適應(yīng)范圍 | pH5-8( 在 pH7-8 具有高活性 ) |
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