BEL-7404肝癌細(xì)胞 上海谷研科技有限公司的原代細(xì)胞株及血清，ATCC細(xì)胞株、hyclone澳洲特級(jí)胎牛血清，優(yōu)等胎牛血清，標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清，gibco特優(yōu)級(jí)胎牛血清血清，新生牛血清。
細(xì)胞術(shù)檢測(cè)樣品制備方法
直接標(biāo)記抗體（FITC標(biāo)記抗體）BEL-7404肝癌細(xì)胞：
（1） 收集1×106個(gè)細(xì)胞，800rpm離心5min，4℃以上冷PBS洗一次。
（2） 用4%多聚甲醛1ml室溫固定40分鐘，800rpm離心5min去上清。加2ml PBS重懸洗滌細(xì)胞，800rpm離心5min。
（3） 用1ml含5% 人血清的 PBS 重懸細(xì)胞，冰上孵育10min，800rpm離心5min去上清。加入200ul含0.5%BSA 和飽和劑量的熒光標(biāo)記抗體（5×105個(gè)細(xì)胞/20ul抗體）的PBS ,避光冰上放置30min,離心棄上清。加入200ul 1% 多聚甲醛固定，待測(cè)即可。
（4） 用流式細(xì)胞儀檢測(cè)熒光值,每管計(jì)數(shù)10 000個(gè)細(xì)胞。[2]
未標(biāo)記抗體間接免疫熒光標(biāo)記法：
（1）收集2×106個(gè)細(xì)胞，用冷的PBS 2ml 洗滌細(xì)胞一次，800rpm離心5min。
（2）用2ml 4%多聚甲醛室溫固定細(xì)胞40min,800rpm離心5min；2ml PBS重懸細(xì)胞，800rpm離心5min；
（3）用1ml含0.2%Triton-X100和5%血清的PBS重懸細(xì)胞，冰上放置10min,800rpm離心5min。
（4）加入飽和劑量未標(biāo)記抗體，冰上放置40min,800rpm離心5min，用2ml冷的PBS 重懸細(xì)胞，800rpm離心5min，洗去未結(jié)合一抗，重復(fù)一次。
（5）加入熒光標(biāo)記（FITC）標(biāo)記的二抗，冰上避光放置40min后，800rpm離心5min，去上清，PBS洗滌兩次。
（6）加入0.5ml 1%多聚甲醛重懸細(xì)胞；固定待測(cè)。
（7）流式細(xì)胞儀檢測(cè)熒光值,每管計(jì)數(shù)10 000個(gè)細(xì)胞。
細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡及DNA倍體分析樣品（PI染色）的制備：
（1）待測(cè)樣本制成單細(xì)胞懸液，然后200g離心5分鐘，棄上清。
（2）用4℃預(yù)冷的70%冷乙醇固定，4℃保存 ，至少固定18小時(shí)。
（3）調(diào)整細(xì)胞濃度為106細(xì)胞/毫升，取1毫升細(xì)胞懸液，用PBS洗三次，細(xì)胞重懸于1毫升PI染液中，37℃孵育30分鐘即可進(jìn)行流式分析。
（4）PI染液終濃度為50微克/毫升，RNase A終濃度為20微克/毫升。
其他*產(chǎn)品：
1-Benzyl-3-piperidinol 1-芐基-3-哌啶醇 14813-01-5
1-BENZYL-4-（CHLOROMETHYL）-1H-PYRAZOLE HYDROCHLORIDE 1-芐基-4-（氯甲基）-1H-吡唑鹽酸鹽 861135-54-8
1-Benzyl-4-N-（1-propanoyl）-N-phenylaMino-4-MethoxyMethylpiperidine N-（1-芐基-4-（甲氧基甲基）哌啶-4-基）-N-苯基丙酰胺 61086-12-2
1-BENZYLPYRROLIDIN-3-YL-METHANOL 1-芐基吡咯烷-3-甲醇 5731-17-9
1-BENZYLPYRROLIDINE-3-CARBALDEHYDE 1-芐基吡咯烷-3-甲醛 72351-49-6
1-BOC-1,8-DIAMINOOCTANE 1-叔丁氧羰基-1,8-二氨基辛烷 88829-82-7
AMINOETHYLPHOSPHINIC ACID 氨乙基次膦酸 74333-44-1
1-AMinoindan 1-氨基茚滿 34698-41-4
英文名稱 中文名稱 CAS號(hào)
1,4-butandiol 1,4-丁二醇 110-63-4
1,4-Butanediol diglycidyl ether 1,4-丁二醇二縮水ganyou醚 2425-79-8
1,4-Butanediol diglycidyl ether diacrylate  53417-29-1
1,4-CyclohexanediMethanol 1,4-環(huán)己烷二甲醇 105-08-8
1,4-CyclohexanediMethanol bis（3,4-epoxycyclohexanecarboxylate） 1,4-環(huán)己烷二甲醇雙（3,4-環(huán)氧環(huán)己烷甲酸）酯 20249-12-1
1,4-Cyclohexanedione Monoethylene acetal 1,4-環(huán)己二酮單乙二醇縮酮 4746-97-8
2-Methyl-1,4-diazabicyclo[2.2.2]octane  1193-66-4
Piperazine 哌嗪 110-85-0
1,4-Diazobicyclo[3.2.2]nonan-3-one 1,4-二氮雜雙環(huán)[3.2.2]壬烷-3-酮 53619-11-7
1,4-Di-Boc-2-（hydroxyMethyl） 2-（羥甲基）-1,4-哌嗪二羧酸二叔丁酯 143540-05-0
1,4-dichlorobutan-2-one  16714-78-6
1,4-DiChlorobutane 1,4-二氯丁烷 110-56-5
1,4-DIDEOXY-1,4-IMINO-D-ARABINITOL  100937-52-8
1,4-DIETHYLBENZENE 1,4-二乙基苯 105-05-5
細(xì)胞凍存
１．將細(xì)胞消化下來(lái)，移入離心管離心，棄上清
２．準(zhǔn)備凍存液比例：５０％ＦＢＳ＋４０％培養(yǎng)基＋１０％ＤＭＳＯ（現(xiàn)用現(xiàn)配）
３．加１．５凍存液在離心管中，將細(xì)胞吹打均勻，移入凍存管內(nèi)．
放入－２０度冰箱２－４小時(shí)后．再放入－８０度冰箱過(guò)夜，第二天放入液氮罐保存
原則　　慢凍速溶
４．加１．５凍存液在離心管中，將細(xì)胞吹打均勻，移入凍存管內(nèi)。
凍存時(shí)間。放入4度冰箱10分鐘。再放入-20度冰箱30分鐘-1小時(shí)。不能超過(guò)1小時(shí)。zui后放入-80度冰箱過(guò)夜。第二天放入液氮中。