P815肥大細(xì)胞瘤細(xì)胞 上海谷研科技有限公司的原代細(xì)胞株及血清，ATCC細(xì)胞株、hyclone澳洲特級(jí)胎牛血清，優(yōu)等胎牛血清，標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清，gibco特優(yōu)級(jí)胎牛血清血清，新生牛血清。
細(xì)胞術(shù)檢測(cè)樣品制備方法
直接標(biāo)記抗體（FITC標(biāo)記抗體P815肥大細(xì)胞瘤細(xì)胞）：
（1） 收集1×106個(gè)細(xì)胞，800rpm離心5min，4℃以上冷PBS洗一次。
（2） 用4%多聚甲醛1ml室溫固定40分鐘，800rpm離心5min去上清。加2ml PBS重懸洗滌細(xì)胞，800rpm離心5min。
（3） 用1ml含5% 人血清的 PBS 重懸細(xì)胞，冰上孵育10min，800rpm離心5min去上清。加入200ul含0.5%BSA 和飽和劑量的熒光標(biāo)記抗體（5×105個(gè)細(xì)胞/20ul抗體）的PBS ,避光冰上放置30min,離心棄上清。加入200ul 1% 多聚甲醛固定，待測(cè)即可。
（4） 用流式細(xì)胞儀檢測(cè)熒光值,每管計(jì)數(shù)10 000個(gè)細(xì)胞。[2]
未標(biāo)記抗體間接免疫熒光標(biāo)記法：
（1）收集2×106個(gè)細(xì)胞，用冷的PBS 2ml 洗滌細(xì)胞一次，800rpm離心5min。
（2）用2ml 4%多聚甲醛室溫固定細(xì)胞40min,800rpm離心5min；2ml PBS重懸細(xì)胞，800rpm離心5min；
（3）用1ml含0.2%Triton-X100和5%血清的PBS重懸細(xì)胞，冰上放置10min,800rpm離心5min。
（4）加入飽和劑量未標(biāo)記抗體，冰上放置40min,800rpm離心5min，用2ml冷的PBS 重懸細(xì)胞，800rpm離心5min，洗去未結(jié)合一抗，重復(fù)一次。
（5）加入熒光標(biāo)記（FITC）標(biāo)記的二抗，冰上避光放置40min后，800rpm離心5min，去上清，PBS洗滌兩次。
（6）加入0.5ml 1%多聚甲醛重懸細(xì)胞；固定待測(cè)。
（7）流式細(xì)胞儀檢測(cè)熒光值,每管計(jì)數(shù)10 000個(gè)細(xì)胞。
細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡及DNA倍體分析樣品（PI染色）的制備：
（1）待測(cè)樣本制成單細(xì)胞懸液，然后200g離心5分鐘，棄上清。
（2）用4℃預(yù)冷的70%冷乙醇固定，4℃保存 ，至少固定18小時(shí)。
（3）調(diào)整細(xì)胞濃度為106細(xì)胞/毫升，取1毫升細(xì)胞懸液，用PBS洗三次，細(xì)胞重懸于1毫升PI染液中，37℃孵育30分鐘即可進(jìn)行流式分析。
（4）PI染液終濃度為50微克/毫升，RNase A終濃度為20微克/毫升。
其他*產(chǎn)品：
3-BROMO-6-CHLORO-2-FLUOROPYRIDINE 3-溴-6-氯-2-氟吡啶,95% 885952-18-1
NA  898838-57-8
DetoMidine hydrochloride 鹽酸地托咪定 90038-01-0
Propylene Glycol Alginate 藻酸-1,2-丙二醇酯 9005-37-2
Tergitol NP-33 壬基酚聚氧乙烯醚 9016-45-9
hydroxypropyl starch 羥丙基淀粉 9049-76-7
Pseudoephedrine 90-82-4
6-Methylquinoline 6-甲基喹啉 91-62-3
2,4-Dichloropyrrolo[2,1-f][1,2,4]triazine 2,4-二氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪 918538-05-3
DiMethocaine 二甲卡因 94-15-5
Benzoyl peroxide 過氧化二苯甲酰 94-36-0
MOMORDINIC 地膚子皂苷ⅠC 96990-18-0
Cyclopropane,1,1-dibroMo-2,2-bis（chloroMethyl）- 1,1-二溴-2,2-二（氯甲基）環(huán)丙烷 98577-44-7
（1S）-1α-（3,5-DiMethoxy-4-hydroxyphenyl）-6,8-diMethoxy-7-hydroxy-1,2,3,4-tetrahydronaphthalene-2β,3α-diMethanol LYONIRESINOL 14464-90-5
1-（2-AMINO-5-CHLOROPHENYL）-2,2,2-TRIFLUOROETHANONE 1-（2-氨基-5-）-2,2,2-三氟乙酮 154598-53-5
TEZAMPANEL  154652-83-2
1-benzylpyrazol-4-amine 4-氨基-1-芐基吡唑 28466-62-8
D-Ribitol-5-phosphate D-核糖醇-5-磷酸 35320-17-3
PYRVINIUM PAMOATE 撲蟯靈 3546-41-6
Trichloroethane 1,1,1-三氯乙烷 71-55-6
英文名稱 中文名稱 CAS號(hào)
細(xì)胞凍存
１．將細(xì)胞消化下來，移入離心管離心，棄上清
２．準(zhǔn)備凍存液比例：５０％ＦＢＳ＋４０％培養(yǎng)基＋１０％ＤＭＳＯ（現(xiàn)用現(xiàn)配）
３．加１．５凍存液在離心管中，將細(xì)胞吹打均勻，移入凍存管內(nèi)．
放入－２０度冰箱２－４小時(shí)后．再放入－８０度冰箱過夜，第二天放入液氮罐保存
原則　　慢凍速溶
４．加１．５凍存液在離心管中，將細(xì)胞吹打均勻，移入凍存管內(nèi)。
凍存時(shí)間。放入4度冰箱10分鐘。再放入-20度冰箱30分鐘-1小時(shí)。不能超過1小時(shí)。zui后放入-80度冰箱過夜。第二天放入液氮中。