U251膠質(zhì)瘤細(xì)胞上海谷研科技有限公司的原代細(xì)胞株及血清，ATCC細(xì)胞株、hyclone澳洲特級胎牛血清，優(yōu)等胎牛血清，標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清，gibco特優(yōu)級胎牛血清血清，新生牛血清。
細(xì)胞術(shù)檢測樣品制備方法
直接標(biāo)記抗體（FITC標(biāo)記抗體）U251膠質(zhì)瘤細(xì)胞：
（1） 收集1×106個(gè)細(xì)胞，800rpm離心5min，4℃以上冷PBS洗一次。
（2） 用4%多聚甲醛1ml室溫固定40分鐘，800rpm離心5min去上清。加2ml PBS重懸洗滌細(xì)胞，800rpm離心5min。
（3） 用1ml含5% 人血清的 PBS 重懸細(xì)胞，冰上孵育10min，800rpm離心5min去上清。加入200ul含0.5%BSA 和飽和劑量的熒光標(biāo)記抗體（5×105個(gè)細(xì)胞/20ul抗體）的PBS ,避光冰上放置30min,離心棄上清。加入200ul 1% 多聚甲醛固定，待測即可。
（4） 用流式細(xì)胞儀檢測熒光值,每管計(jì)數(shù)10 000個(gè)細(xì)胞。[2]
未標(biāo)記抗體間接免疫熒光標(biāo)記法：
（1）收集2×106個(gè)細(xì)胞，用冷的PBS 2ml 洗滌細(xì)胞一次，800rpm離心5min。
（2）用2ml 4%多聚甲醛室溫固定細(xì)胞40min,800rpm離心5min；2ml PBS重懸細(xì)胞，800rpm離心5min；
（3）用1ml含0.2%Triton-X100和5%血清的PBS重懸細(xì)胞，冰上放置10min,800rpm離心5min。
（4）加入飽和劑量未標(biāo)記抗體，冰上放置40min,800rpm離心5min，用2ml冷的PBS 重懸細(xì)胞，800rpm離心5min，洗去未結(jié)合一抗，重復(fù)一次。
（5）加入熒光標(biāo)記（FITC）標(biāo)記的二抗，冰上避光放置40min后，800rpm離心5min，去上清，PBS洗滌兩次。
（6）加入0.5ml 1%多聚甲醛重懸細(xì)胞；固定待測。
（7）流式細(xì)胞儀檢測熒光值,每管計(jì)數(shù)10 000個(gè)細(xì)胞。
細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡及DNA倍體分析樣品（PI染色）的制備：
（1）待測樣本制成單細(xì)胞懸液，然后200g離心5分鐘，棄上清。
（2）用4℃預(yù)冷的70%冷乙醇固定，4℃保存 ，至少固定18小時(shí)。
（3）調(diào)整細(xì)胞濃度為106細(xì)胞/毫升，取1毫升細(xì)胞懸液，用PBS洗三次，細(xì)胞重懸于1毫升PI染液中，37℃孵育30分鐘即可進(jìn)行流式分析。
（4）PI染液終濃度為50微克/毫升，RNase A終濃度為20微克/毫升。
其他*產(chǎn)品：
1-PropanaMine,N,N-diMethyl-3-（octadecyloxy）- 硬脂氧丙基二甲胺 17517-01-0
propylphosphonic anhydride solution 1-丙基磷酸酐 68957-94-8
2-Methoxy-1-propanol （2S）-2-甲氧基-1-丙醇 1589-47-5
1-Propanone,3-（diMethylaMino）-1-（3-Methoxyphenyl）-2-Methyl- TAPENTADOL中間體 197145-37-2
1-Propene, 2-Methyl-, sulfurized  68511-50-2
1-Propyl-4-piperidone N-丙基-4-哌啶酮 23133-37-1
1-Propylpyrrolidin-2-one 1-丙基-2-吡咯烷酮 3470-99-3
1-PYRENEDECANOIC ACID 1-芘癸酸 64701-47-9
1-Pyridin-2-yl-ethylaMine 1-吡啶-2-乙胺 40154-81-2
1-Pyrrolidinecarboxylicacid,3-cyano-4-hydroxy-, 1,1-diMethylethyl este N-BOC-3-氰基-4-羥基吡咯烷 197143-33-2
1-Pyrrolidinepropanoicacid,alpha-aMino-（9CI）  773825-57-3
1R-cis-PerMethrinic acid 1R-順式二氯菊酸 55667-40-8
1-TERT-BUTYL-3-NITROBENZENE 間叔丁基硝基苯 23132-52-7
1-Tetradecanol 1-十四醇 112-72-1
1-Tetralone 1-四氫萘酮 529-34-0
1-Triacontanol cerotate  14206-01-0
1-vinylcyclohexene 1-乙烯[基]環(huán)己烯 2622-21-1
Pyrene, 1-ethenyl 1-乙烯 17088-21-0
2 3 4 5 6-PENTAFLUOROBENZOIC ANHYDRIDE  15989-99-8
2 4-BIS（TRIMETHYLSILYL）-6-AZAURACIL 3,5-二[（*基硅）氧]基-1,2,4-三嗪 17331-61-2
2 4'-METHYLENEBIS（PHENYL ISOCYANATE） 1-異氰酸根-2-[（4-異氰酸根苯基）甲基]苯 5873-54-1
2 6-DICHLOROPYRIDINE-3-CARBOXALDEHYDE 2,6-二氯-3-吡啶甲醛 55304-73-9
2 Biphenol 2,2'-二羥基聯(lián)苯 1806-29-7
細(xì)胞凍存
１．將細(xì)胞消化下來，移入離心管離心，棄上清
２．準(zhǔn)備凍存液比例：５０％ＦＢＳ＋４０％培養(yǎng)基＋１０％ＤＭＳＯ（現(xiàn)用現(xiàn)配）
３．加１．５凍存液在離心管中，將細(xì)胞吹打均勻，移入凍存管內(nèi)．
放入－２０度冰箱２－４小時(shí)后．再放入－８０度冰箱過夜，第二天放入液氮罐保存
原則　　慢凍速溶
４．加１．５凍存液在離心管中，將細(xì)胞吹打均勻，移入凍存管內(nèi)。
凍存時(shí)間。放入4度冰箱10分鐘。再放入-20度冰箱30分鐘-1小時(shí)。不能超過1小時(shí)。zui后放入-80度冰箱過夜。第二天放入液氮中。